[发明专利]一种药物甲基苯丙胺的表面等离子体共振检测方法

说明书

技术领域

本发明属于检测技术领域，涉及一种药物甲基苯丙胺的表面等离子体共振快速检测方法。

背景技术

近年来，甲基苯丙胺在世界上不少国家和地区已成为主流毒品，制贩甲基苯丙胺的犯罪活动正日益猖獗。在国内，其滥用现象也在不断蔓延扩大。

目前应用于甲基苯丙胺分子检测的技术手段或方法较多目前采用的方法主要有薄层扫描法、气相色谱法(GC)、气相色谱/质谱法(GC/MS)、高效液相色谱、质谱法(HPLC/MS)。大多数气相色谱研究为了改善甲基苯丙胺及苯丙胺的色谱行为，常对其进行衍生化处理。衍生化试剂多采用进口、昂贵的试剂，所建方法适用性受限。薄层扫描法和高效液相色谱法相对于气相色谱法灵敏度较低。因此，上述方法均不适合犯罪现场快速检测的需要。在此背景下，国内外法庭科学工作者积极开发新的检测技术和样品预处理方法，不同途径进行种种努力，以寻求建立灵敏、准确、经济、快速的甲基苯丙胺在生物样品中的检测方法。在这方面，卓有成效的是表面等离子体共振生物传感器。

表面等离子体波共振(Surface Plasmon Resonance，SPR)是一种物理光学现象，它通过测量金属表面物质折射率的变化来研究物质的化学和物理吸附性质。近十几年来基于SPR原理的传感器及其应用研究获得了长足的发展。与常规检测技术相比，SPR具有高灵敏度、响应快、体积小、机械强度大、检测过程快捷、能够获得实时数据、操作方便、无须标记、可保持分子的生物活性、抗电磁干扰能力强和光纤相连可实现数据的远程采集和连续在线监控等突出优点，因此受到人们的广泛关注，成为检测甲基苯丙胺的一种新颖的手段。例如，日本的Go Sakai等人研究成功了利用表面等离子体共振生物传感器通过溶液竞争法对甲基苯丙胺的快速检测。

免疫分析方面的研究是SPR传感技术应用时间最早、应用范围最广、发展最为完善的领域之一，然而由于技术具有需要动物实验、对检测环境要求苛刻、造价昂贵以及芯片重复使用性能较差等难以克服的缺点，因此限制了SPR技术在甲基苯丙胺检测中的的发展。

我们在专利申请号为200910118997.6的发明专利中报道的一种传感器的甲基苯丙胺分子识别敏感芯片及制备方法的基础上，结合表面等离子体共振检测仪，提供一种药物甲基苯丙胺的表面等离子体共振快速检测方法。

发明内容

本发明的目的是为了解决现有的SPR技术在检测甲基苯丙胺时存在对检测环境要求苛刻、造价昂贵、选择性较差等问题，提供一种药物甲基苯丙胺的表面等离子体共振快速检测方法，可以应用于有机溶剂中大批量样品药物甲基苯丙胺的直接检测。

本发明的目的是通过下述技术方案实现的。

本发明将一种传感器的甲基苯丙胺分子识别敏感芯片作为表面等离子体共振检测仪的传感芯片，当待测样品通过传感芯片表面时，利用表面等离子体共振检测仪检测待测样品与分子识别敏感芯片界面处全反射光的光强变化来直接测定待测样品中的甲基苯丙胺的含量。具体操作步骤如下：

(1)将传感器的甲基苯丙胺分子识别敏感芯片固定在表面等离子体共振检测仪中作为传感芯片；

(2)将有机溶剂流过感芯片表面，待反射光强达到稳定不变时，对反射光强按角度进行扫描，记录下SPR光谱图；

(3)取不同浓度的甲基苯丙胺标准溶液，按照由低浓度到高浓度的顺序，分别流过表面等离子体共振传感芯片的表面；

每次流入一定浓度的甲基苯丙胺标准液，与传感芯片反应1～10min，然后流过有机溶剂，待反射光强达到稳定不变时，对反射光强按角度进行扫描，记录下此浓度的甲基苯丙胺标准液与传感芯片发生吸附反应后的SPR光谱图，至此完成一个浓度的甲基苯丙胺标准液的检测；

依此类推，直到得到各个浓度的甲基苯丙胺标准溶液与传感芯片反应后的SPR光谱图。

(4)分别将(3)中得到的不同浓度的甲基苯丙胺标准溶液与传感芯片反应后的SPR光谱图与(2)中的SPR光谱图进行比较，计算各浓度下吸附反应前后引起的SPR共振角的位移值Δθ；

(5)以SPR共振角的位移值Δθ为纵坐标，以加入的甲基苯丙胺标准溶液浓度值的负对数做为横坐标绘制标准曲线；

(6)按标准曲线的测试方法检测待测样品，根据其与传感芯片发生吸附反应前后引起SPR共振角的位移值Δθ，在标准曲线上读出甲基苯丙胺的含量；

其中，甲基苯丙胺标准溶液的配制方法如下：称取一定量的纯甲基苯丙胺固体，加入有机溶剂定容，配制系列甲基苯丙胺标准溶液的浓度为1ppb、10ppb、100ppb、1ppm、10ppm和100ppm；