[发明专利]一种通过诱变提高芽孢杆菌对镉的耐受性的方法

权利要求书

1.一种通过诱变提高芽孢杆菌对镉的耐受性的方法，其特征依次包括以下步骤：

(1)将枯草芽孢杆菌进行预培养，在牛肉膏蛋白胨培养基上，经200r/min振荡培养10h后，离心去除培养基，用生理盐水制备菌悬液。加入玻璃球振荡分散，以脱脂棉过滤，使形成单细胞，分散程度达90-95％。

(2)对步骤(1)中所制备的菌悬液3mL(10⁶个/mL)置于直径7cm的平底培养皿中，进行紫外线诱变：用15W功率的紫外灯管和固定距离为30cm的条件下照射5min后，对诱变后的活菌落进行筛选，获得对镉具耐受性的突变芽孢杆菌。

(3)对步骤(2)诱变后的突变菌株进行筛选的方法为浓度梯度平板初筛和摇瓶发酵复筛相结合的两步筛选法。

2.根据权利要求1所述的通过诱变提高芽孢杆菌对镉的耐受性的方法，其特征在于：步骤(1)中出发菌枯草芽孢杆菌对镉的耐性为0.25mmol/L。

3.根据权利要求1所述的通过诱变提高芽孢杆菌对镉的耐受性的方法，其特征在于：步骤(1)的每升液体培养基以及步骤(3)的摇瓶发酵培养基成分为，蛋白胨10g、氯化钠5g、牛肉膏5g、pH 7.2。步骤(3)的浓度梯度平板固体培养基成分为，每升含有蛋白胨10g、氯化钠5g、牛肉膏5g、琼脂20g、pH 7.2。

4.根据权利要求1所述的通过诱变提高芽孢杆菌对镉的耐受性的方法，其特征在于：步骤(2)的15W功率的紫外灯管需预热20min，以稳定光波(254nn)；平底培养皿应在磁力搅拌器上，控制温度为37℃。

5.根据权利要求1所述的通过诱变提高芽孢杆菌对镉的耐受性的方法，其特征在于：步骤(3)的浓度梯度平板初筛和摇瓶发酵复筛的培养基中含镉浓度为0.36mmol/L。