[发明专利]一种反映肝组织学病变形态的组织微阵列芯片

说明书

一、技术领域

本发明属于生物技术领域，更具体地，涉及在片基上固定有组织芯片。

二、背景技术

随着组织学、病理学的发展，人们对人体或其他动植物的认识，从解剖学上的器官水平向组织、细胞水平发展。但由于完整的器官很难用显微镜观察，因此需要把器官切成很薄的切片进行染色观察，为了解决这个问题，出现了组织学技术。该方法的原理是通过把器官切成小块组织，用福尔马林固定后，利用酒精脱去该组织中的水分，再浸入二甲苯或苯溶液脱去酒精，最后组织块浸入熔化石蜡溶液中脱去二甲苯，放入模具内用石蜡溶液进行包埋，冷却后形成石蜡块。该石蜡块利用切片机进行切片，把蜡片裱于玻璃片上再进行烤片、脱蜡，染色、封片后就可以用显微镜进行观察研究。目前，组织学技术不仅是单纯染色显微镜观察，还出现了各种特殊染色、免疫组织化学技术、原位杂交技术、原位PCR技术。

近年来随着基因组学、蛋白组学研究发展，人们研究的生理和疾病已逐步从分子水平向细胞水平及组织水平发展，因此，如何利用组织开展研究，是目前研究中所要解决问题之一。采用传统组织技术的研究方法，由于组织标本需要量大，实验工作量大，难以适应研究的学要。近年来，出现了组织微阵列芯片技术，解决了上述问题。该技术将数十个、数百个乃至上千个小的组织片整齐地排列在某一载体上(通常是载玻片)而制作成微缩组织切片，其基本操作程序(如图1所示)包括：设计并拟定组织芯片的分类系列、核对组织或有关疾病的病理诊断、组织定位、阵列蜡块的制作、再从源蜡块上钻取组织并转移到空白石蜡块的相应位置、组织芯片切片。组织芯片的特点有：体积小、信息含量大、高通量；减少或避免了对原始组织蜡块的破坏；组织样本的定位准确，减少无效组织；批量制作及可能的结果分析自动化；不同来源的病例的处理、染色和分析条件相同。

肝病是一组常见、多发行的疾病，通过何种研究工具，从分子、细胞、组织水平上观察肝病的发生、发展的整个过程从而找到有意义的基因和表达的蛋白质，是目前急需解决的问题。因此，本领域迫切需要建立起一种组织研究工具以解决上述问题。

三、发明内容

本发明的目的是提供一种高效、简便和低成本的肝组织微阵列芯片，从而可以在分子、细胞、组织水平上研究疾病的发生、发展的整个过程。该芯片亦可筛选出特异性、有意义的基因和及其表达的蛋白质。

该肝组织微阵列芯片，包括片基、片基上连接有特异性组织点。片基可以是玻璃、生物膜、硅芯片、聚二氟乙烯膜或硝酸纤维膜。片基上组织点所需不同大小直径可为0.7mm，1.0mm，1.5mm，2.0mm，2.5mm，3.0mm，3.5mm，4.0mm，4.5mm，5.0mm，5.5mm，6.0mm等。，密度为500个点/平方厘米～1个点/平方厘米，每张片基上可有1000点～10点不等。可以矩阵列方式、园形方式或其他形状排列。

所述组织点至少选自以下正常或疾病病变的肝组织：肝正常组织，肝硬化组织，肝细胞腺瘤，胆管细胞腺瘤，胆管细胞囊腺瘤，胆管细胞乳头瘤病，间叶血管瘤，间叶脂肪瘤，肝细胞肝癌，肝母细胞瘤，胆管细胞肝癌，混合型肝癌。组织点还可选取其它器官正常或疾病病变组织作为对照：食道癌及癌旁正常组织，胃癌及癌旁正常组织，结肠癌及癌旁正常组织，直肠癌及癌旁正常组织，胰腺癌及癌旁正常组织，肺癌及癌旁正常组织，肾癌及癌旁正常组织，前列腺癌及癌旁正常组织，乳腺癌及癌旁正常组织。

下面结合实施例具体阐述本发明内容

1.肝病不同发病机理及病变形态组织芯片