[发明专利]一种药品、保健食品和食品中PDE5型抑制剂的高效液相色谱检测方法

说明书

技术领域

本发明涉及一种高效液相色谱检测方法，尤其涉及一种药品、保健食品和食 品中PDE₅型抑制剂的高效液相色谱检测方法。

背景技术

补肾壮阳类中成药、保健食品和食品中非法添加化学成分的行为日益猖獗， 且针对标准的高科技造假行为越来越多，严重威胁人民群众的身体健康。查阅 大量文献发现，非法添加的壮阳类化学成分主要以PDE₅型抑制剂(磷酸二酯酶 5型抑制剂，phosphodiesterase type-5 inhibitor)为主。美国食品药品管理局(FDA) 先后批准了西地那非、伐地那非和他达拉非三种PDE₅型抑制剂，成为补肾壮阳 类样品中添加最早和最频繁的化学成分。PDE₅型抑制剂属于处方药，服用时有 严格的适应症、禁忌症和一定的副作用，某些病人不能服用，患者在不知情的 情况下摄入容易引起严重的药物不良反应，甚至导致死亡。近年来，还发现了 添加大量上述三种PDE₅型抑制剂的未知衍生物，这些化学成分均未经过严格的 安全性实验，存在着严重隐患。

查处补肾壮阳类中成药、保健食品和食品中非法添加PDE₅型抑制剂的行为 是一项长期的任务，涉及范围广，需要进行大量的检验工作。中药本身成分复 杂，各成分之间干扰严重，检验标准还很不完善。单味的中药成分已很复杂， 复方中成药、保健食品和食品的化学成分更为复杂多样，加上生产工艺的影响， 使得添加化学成分的检测方法要求更具专属性。现有技术中，补肾壮阳类中成 药、保健食品和食品中的PDE₅型抑制剂的检测主要采用液质谱联用法，但该仪 器价格过于昂贵，维护成本较高，对仪器操作人员的要求也较高，只能在少数 检测条件较好的实验室中使用，缺少一种简单、准确、能同时测定多个化学成 分高效液相色谱方法。随着国内仪器配置水平的不断提高，价格适中、准确率 较高的高效液相色谱方法日益受到重视，该方法适合在普通检测机构使用。

发明内容

为克服上述技术缺陷，本发明的目的是提供一种补肾壮阳类中成药、保健 食品和食品中十一种PDE₅型抑制剂的高效液相色谱检测方法。

本发明的一种药品、保健食品和食品中PDE₅型抑制剂的高效液相色谱检测 方法，采用二极管阵列检测器，使用十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂的液相色 谱柱，流动相为磷酸三乙胺溶液-甲醇-乙腈体系，流速为0.5～1.5ml/min，柱 温为20～50℃，样品预处理为采用乙腈或甲醇超声提取样品，选择在波长范围为 200～400nm内进行样品分析。

所述磷酸三乙胺溶液-甲醇-乙腈体系中各组分的体积比为磷酸三乙胺溶 液∶甲醇∶乙腈为80～0∶10～50，10～50。优选的，采用梯度洗脱，流动相A各 组分体积比为磷酸三乙胺溶液∶甲醇∶乙腈为60∶20∶20，流动相B各组分体 积比为磷酸三乙胺溶液∶甲醇∶乙腈为8∶46∶46。下面的流动相均用体积比表 示。

其中，磷酸三乙胺溶液的浓度优选为0.01～0.1mol/L，pH值为2.0～4.0。

更优的，所述磷酸三乙胺溶液的浓度为0.05mol/L，pH值为2.8。

优选的，在波长为230nm时检测。

优选的，所述流速为1ml/min，所述柱温为35℃。

优选的，所述样品预处理采用乙腈超声溶解提取。

样品分析是根据保留时间和紫外光谱图进行定性分析，将供试品的紫外吸 收光谱图与对照品的紫外吸收光谱图进行比较，或者将供试品的紫外吸收光谱 图与各PDE₅型抑制剂的紫外吸收光谱特征进行比较。

供试品中PDE₅型抑制剂按照外标法根据峰面积进行定量分析，外标法计算 含量时一般采用相应的对照品，在相应的对照品难以获得的情况下，也可以用 容易获得的结构类似物作为参考对照品测定相对含量。

与现有技术相比，本发明具有如下有益效果：