[发明专利]引起针对大流行性流感病毒的免疫应答的方法

说明书

技术领域

本发明涉及在受试者体内引起或诱导针对流感病毒的大流行性亚型的免疫应答的方法，并且更具体地涉及在受试者体内引起或诱导免疫应答的方法，该免疫应答保护该受试者对抗随后的甲型流感的致病性的、大流行性亚型(如，已经在人体内造成感染的甲型禽流感(H5N1))的攻击。

背景技术

流行性感冒是人类疾病的主要病因，并且在世界范围内是显著的发病率和死亡率的来源，每年有大量的人类群体受到影响。流感病毒可以被细分为甲型、乙型和丙型。在人类群体中传播的病毒主要是甲型流感和乙型流感。

每年接种疫苗是预防感染的主要策略。甲型流感菌株基于血细胞凝集素(HA)和神经氨酸苷酶(NA)这两种病毒表面跨膜蛋白的抗原性差异可进行进一步的分型。到目前为止，已鉴定出甲型流感病毒的16种HA(HA1-16)和9种NA(NA1-9)的糖蛋白亚型。目前，两种甲型流感的亚型在人类中传播(H1N1和H3N2)[1]。

有时，当一种新型流感病毒出现而人类对其的免疫力很低或没有免疫力时可发生流感大流行。在上世纪，三种甲型流感菌株大流行的爆发造成了人类大量的与流感相关的死亡(1918，H1N1；1957，H2N2；1968，H3N2)[2]。1997年在香港，一种高致病性H5N1禽流感病毒直接从鸡传给人类，造成18例确认的感染中的6例死亡[3；4]。从那时起，对流感大流行的关注经由致病性H5N1病毒的零星爆发得到加强。这些爆发导致了258个病例、其中导致153例死亡，带来在从亚洲横贯欧洲遍及六个国家的爆发(柬埔寨、中国、印度尼西亚、泰国、土耳其以及越南)[5]。

自从1997年以来，几种其它亚型的病毒(包括H2N2、H9N2、H7N7、H7N3以及H10N7)也已牵涉到人类的感染，并且因此这些亚型也代表着重大的大流行性威胁。由于不可能预测哪种亚型的流感病毒会造成下一次大流行，所以一种理想的疫苗将通过引起免疫应答来保护宿主免受严重疾病或死亡，这种免疫应答保护该宿主针对宽范围的流感病毒(来自相同亚型或不同亚型)。然而，由于以下所列原因，依靠诱导中和抗体应答(主要对抗HA和NA)的可供使用的疫苗是流感菌株高度特异的。

流感病毒的HA和NA糖蛋白经历抗原变异作为逃避宿主的免疫应答的手段[6]。在全身位点或黏膜位点上存在对HA糖蛋白特异的病毒中和抗体保护不受病毒的感染。然而，由于抗原的变异性，针对HA的抗体应答是菌株高度特异的，并且从不同亚型的流感病毒中并未识别出这种HA，或甚至在相同的亚型中也未识别出高度相异的菌株[7]。另一方面，细胞介导的免疫，特别是CD8⁺细胞毒性T细胞(CD8⁺CTL)主要负责清除病毒感染的细胞，并且由此限制了感染的严重程度，并促进感染恢复[8]。与HA相反，细胞介导的免疫应答的内部蛋白靶-关键的是PB2、PA、核蛋白(NP)以及基质蛋白(M)-并不倾向于抗原性漂移，并因此是高度保守的。例如，H5N1甲型菌株/印度尼西亚/5/05和甲型/越南/1194/04的NP和M蛋白与甲型/波多黎各/8/34共享了大概94％的氨基酸同一性(如在图1中所示)。甲型/波多黎各/8/34是1934年分离的一种H1N1病毒，并且是工程疫苗菌株的结构蛋白的来源，这些工程疫苗菌株传统上通过重配(reassortment)进行制备，而最近更多通过反向遗传学进行制备。此外，在这些不同的流感亚型之间还存在着高度保守的CTL表位。这种分析延伸至包括同样构成潜在的大流行性威胁的其它病毒亚型(包括H7N7和H9N2)，它证实在所有甲型菌株病毒中都具有高度保守的CTL表位。因此，与高度菌株特异的HA抗体应答不同，不论甲型流感菌株的亚型，CTL应答都具有广泛有效的潜力[9]。因此，诱导有力的CTL应答对大流行性流感疫苗而言是高度希望的特性。