[发明专利]Pitman moore狂犬病病毒株对原代鸡胚成纤维细胞培养物的适应方法有效
申请号: | 200880023072.0 | 申请日: | 2008-04-24 |
公开(公告)号: | CN101730544A | 公开(公告)日: | 2010-06-09 |
发明(设计)人: | 普拉迪普·马詹拉勒·帕特尔;潘卡杰·拉曼巴伊·帕特尔 | 申请(专利权)人: | 卡迪拉保健有限公司 |
主分类号: | A61K39/205 | 分类号: | A61K39/205;C12N5/06 |
代理公司: | 北京康信知识产权代理有限责任公司 11240 | 代理人: | 吴贵明;张英 |
地址: | 印度古*** | 国省代码: | 印度;IN |
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摘要: | |||
搜索关键词: | pitman moore 狂犬病 病毒 原代鸡胚成 纤维 细胞培养 适应 方法 | ||
1.Pitman moore狂犬病病毒株对用于狂犬病疫苗的生产的原代 鸡胚成纤维细胞的适应方法,其中,所述方法包括以下步骤:
a)在适合的培养基中,通过至少7次传代使Pitman moore 狂犬病病毒株适应于原代鸭胚成纤维细胞培养物;
b)随后,在适合的培养基中,通过至少4次传代使所述 病毒适应于原代鸡胚成纤维细胞培养物。
2.根据权利要求1所述的方法,其中,所采用的所述培养基是 PCM。
3.根据权利要求1中所述的方法,其中,所述培养基进一步包含 人血清白蛋白、水解明胶、碳酸氢钠和适合的抗生素溶液。
4.前述权利要求中任一项所述的适应方法,其中,所述细胞数量 保持在1.4-2.2×106个细胞/ml的范围内。
5.根据权利要求1所述的适应方法,其中,所述适应在PET TC 转瓶或多层TC瓶中完成。
6.通过权利要求1所述的方法由在原代鸡胚成纤维细胞中适应 的Pitman moore株制备狂犬病疫苗的方法。
7.根据权利要求6所述的方法,包括以下步骤:
-通过权利要求1所述的方法使Pitman moore狂犬病病 毒株适应于原代鸡胚成纤维细胞,以获得主种子;
-通过进一步将所述主种子在原代鸡胚成纤维细胞中传 代1-5次而制备工作种子;
-在PCEC培养基中,由所述工作种子生产病毒;
-浓缩并纯化所述病毒;
-灭活所述病毒。
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