[发明专利]从构树叶中提取一种黄酮类物质在制备抗皮肤真菌感染药物的应用

说明书

一、技术领域

本发明涉及医药领域，特别一种从构树叶中提取一种黄酮类物质在制备抗皮肤真菌感染药物的应用。

二、技术背景

构树叶来源于桑科构属植物构树(Broussonetia papyrifera(L1)Vent.)的叶片，构树叶又名：构叶、谷树叶，性味：甘、凉，功效：清热凉血，收敛利湿。通常用于鼻衄、吐血、崩漏、肠炎、痢疾、白浊、湿疹，历代本草及民间用药均表明其具有治疗皮肤病，如皮癣、湿痒、癣疮等功效，《本草纲目》云“：去风湿肿胀……，癣疮”，皮肤真菌感染是一种常见病症，有人研究发现，构树叶乙醇提取物具有抗真菌感染的作用，提示构树叶中的生物碱、苷类及苷元、萜类等极性较强的物质具有抗菌活性，随着菌株的变异和耐药性的增强，加之化学药物本身的副作用，使化学药物的应用受到了限制，从而使众多学者对中草药抗真菌进行了大量研究，但至今未见有从构树叶中提取黄酮类物质用于制备抗皮肤真菌感染药物的报导。构树在我国分布十分广泛，药材来源充足，那么能否从构树叶中提取用于研制出新的抗皮肤真菌感染的药物呢？如能成功，不但可以充分利用资源，减少皮肤病患者的痛苦，还可以创造出更大经济效益和社会效益。

三、发明内容

针对上述情况，本发明之目的就是提供一种从构树叶中提取一种黄酮类物质在制备抗皮肤真菌感染药物的应用，可有效用于制备抗皮肤真菌感染的药物，解决抗皮肤真菌感染的药物问题，其解决的技术方案是，取构树叶，粉碎，打成粗粉，加入10-8倍量构树叶粗粉重量体积的质量浓度为70％的乙醇，加热回流提取2次，每次两小时，合并两次的提取液，减压浓缩，回收溶剂至无醇味，所得浓缩液，依次用乙醚、乙酸乙酯、正丁醇、水萃取，取正丁醇部位，回收正丁醇，得构树叶黄酮类浸膏，即得抗皮肤真菌感染的黄酮类物质，得率为0.2％，将其溶于适量水中并加入吐温-80溶解均匀，每200g构树叶粗粉提取的黄酮类物质中加吐温-803g溶解，得溶解液，使溶解液每毫升含2g黄酮类物质，作为药液，药液经100℃，45min灭菌，然后4℃保存，备用；所说的重量体积是指固体物质(构树叶)用g，液体(乙醇)用ml，如构树叶10倍量重量体积的乙醇，即1g构树叶加10ml乙醇，以此类同。本发明方法简便，所得黄酮类物质纯度高达95％，稳定性好，有效用于制备抗皮肤真菌感染的药物，开辟了构树叶制备药物的新领域，是中医药学上的一大创新，造福于人类。

四、具体实施方式

以下结合实际情况对本发明的具体实施方式作详细说明。

在具体实施中，本发明可取粉碎后的构树叶粗粉200g，加入10倍量构树叶粗粉重量体积的质量浓度为70％的乙醇2000ml，加热回流提取两小时，备用；再取构树叶粗粉加8倍量构树叶粗粉重量体积的质量浓度为70％的乙醇1600ml，加热回流提取两小时，合并两次的提取液，减压浓缩，回收溶剂至无醇味，所得提取的浓缩液，依次用乙醚、乙酸乙酯、正丁醇、水萃取，取正丁醇部位，回收正丁醇，得构树叶黄酮类浸膏，将其溶于适量水中并加入吐温-803g，溶解至100ml，得溶解液，使溶解液成为每毫升含2g黄酮类物质的药液，药液经100℃，45min灭菌，4℃保存，备用。

本发明的黄酮类物质有效用于制备抗皮肤真菌感染的药物，并为试验所证明，有关试验资料如下：

经以下对比试验，结果表明，本发明对各种真菌抑制作用比较稳定：

1、药物培养基的制作：将本发明药液2ml加入8ml沙氏琼脂培养基(蛋白胨10g，水1000毫升，琼脂15g，葡萄糖40g)中混匀，使成为终浓度为400mg/ml的药物培养基，分装大试管并作等倍稀释，即第一管至第八管依次为400mg/ml，200mg/ml，100mg/ml，50mg/ml，25mg/ml，12.5mg/ml，6.25mg/ml，3.125mg/ml的浓度。

2、对照药液的制备：取硝酸咪康唑软膏(每克含硝酸咪康唑20毫克)10g，溶于适量水中并加入数滴吐温-80增溶，最后定容至100ml，使硝酸咪康唑浓度为0.2g/ml。100℃，45min灭菌后低温保存。

3、对照培养基的制作：硝酸咪康唑培养基浓度为含硝酸咪康唑20mg/ml；另设不含任何抗菌成分的空白对照培养基。