[发明专利]体外检测类风湿关节炎抗体的组合物及其应用

权利要求书

1.一种抗原组合物，包含多肽I和多肽II，其特征在于所述的多肽I与多肽I和多 肽II之和的摩尔比比值为0-1；

所述的多肽I的氨基酸序列如下：His-Gln-Cys-His-Gln-Phe-Arg-Phe-Cit -Gly-Cit-Ser-Arg-Ala-Ala-Cys-Gly，其上第三位和第十六位Cys通过巯基形成 二硫键，而使多肽成环状结构；

所述的多肽II的氨基酸序列如下：His-Gln-Cys-Ala-Arg-Phe-Gln-Met-Arg -His-Cit-Arg-Leu-Ile-Arg-Cys-Gly，其上第三位和第十六位Cys通过巯基形成 二硫键，而使多肽成环状结构。

2.如权利要求1所述的抗原组合物，其特征在于多肽I与多肽I和多肽II之和的摩尔 比比值为0.5。

3.如权利要求1所述的抗原组合物，其特征在于所述多肽I或II能与HLA-DR结合， 形成HLA-DR-多肽I或II复合物。

4.如权利要求1所述的抗原组合物，其特征在于所述多肽I或II能与类风湿关节炎免 疫抗体结合，形成抗原-抗体复合物。

5.一种包含权利要求1所述抗原组合物的免疫抗体体外检测试剂组合物，其特征在于 还包括亲和素或链霉亲和素、酶标记抗人IgG抗体和显色底物。

6.如权利要求5所述的体外检测试剂组合物，其特征在于所述的抗人IgG抗体经辣根 过氧化物酶标记。

7.如权利要求5所述的体外检测试剂组合物，其特征在于所述的显色底物为四甲基联 苯氨。

8.如权利要求6或7所述的体外检测试剂组合物，其特征在于所述的多肽结合有生物 素。

9.如权利要求8所述的体外检测试剂组合物，其特征在于所述的多肽N末端结合有生 物素标记。

10.如权利要求5所述的体外检测试剂组合物，其特征在于所述的亲和素或链霉亲和素 直接结合于疏水性器材表面，所述多肽I或II通过其上标记的生物素与所述亲和素或链霉亲 和素非共价亲和。

11.一种体外检测试剂组合物的制备方法，其特征在于通过如下具体步骤制备：

a)配置包被液；

b)将包被液加入疏水性器材表面；

c)在0-40℃条件下保存6小时以上；

d)洗涤疏水性器材表面2次以上；

e)加入含有经生物素标记的权利要求1所述的抗原组合物的溶液于洗涤后的疏水性 器材表面；

f)10-30℃条件下保存1小时以上；

g)洗涤疏水性器材表面2次以上；

所述的包被液pH为7.0-8.0的缓冲液，其中溶解有浓度为0.1-10μg/mL的亲和素或链 霉亲和素；所述的疏水性器材为容器或直板。

12.如权利要求11所述的制备方法，其特征在于所述的包被液为pH7.4的磷酸缓冲 液或磷酸缓冲盐溶液，所述的链霉亲和素浓度为2μg/mL。

13.如权利要求11所述的制备方法，其特征在于所述的疏水性器材为酶标板。

14.如权利要求11所述的制备方法，其特征在于所述的疏水性器材由聚苯乙烯、聚乙 烯或聚氯乙烯制成。

15.如权利要求11所述的制备方法，其特征在于在所述的0-40℃温度范围选择0- 10℃。

16.如权利要求11所述的制备方法，其特征在于在所述的10-30℃温度范围选择20- 25℃。