[发明专利]一种产漆酶的灵芝菌株

说明书

技术领域

本发明涉及生化领域，具体涉及一种发酵漆酶的真菌菌株。

背景技术

漆酶(Laccase，EC1.10.3.2)是一类含铜的多酚氧化酶，主要包括植物漆酶和真菌漆酶；前者主要催化底物的氧化聚合，与植物伤口保护等有关[雷福厚等(2003)中国生漆，2003(1)：4-7]；后者主要在木腐菌中发现，能促进木质素等底物的降解[Bajpai(1999)Biotech Prog，15：147-157；涂宁宇等(2006)造纸科学与技术，25：27-31]。真菌漆酶的用途十分广泛。在木材加工中，用漆酶处理促使表面胶合，可替代胶合剂；在造纸工业中，漆酶用于漂白纸张，降低纸浆硬度、降低化学品用量和降低能耗以及降低废液中有机氯含量；在食品业中，漆酶用于去除啤酒和果汁混浊；在纺织业中，漆酶用于脱色、漂白和去除木质素；在环境保护中，漆酶用于污染物脱毒、土壤修复以及有机磷农药分解等。因此，漆酶具有极大的应用潜力[Bourbonnais等(1997)Appl Environ Microbial，63：4627-4632；王国栋等(2003)植物学通报，20：469-475]。

尽管漆酶的用途广，但产量的不足极大地限制了其潜能的发挥。目前有关漆酶的研究多是围绕提高漆酶的产量而展开的，如筛选优良的产漆酶菌株或构建基因工程菌，探索最佳的产漆酶培养条件，以期能进行工业化生产。近十几年尤其是近五六年来，这方面的研究取得了一定的进展，然而仍存在着不少问题：多数试验菌株在人工和天然培养基上生长时的发酵周期长、不易操作，产酶能力弱，且往往需要有毒或昂贵的诱导剂，不环保，致使利用现有菌种生产成本高，限制了漆酶的产业化进程。

灵芝(Ganoderma)是一类寄生在树木上的真菌，能产生漆酶，将所寄生树木的木质素消化。关于灵芝的研究主要围绕着其药用价值和保健功能这两个方面展开，而关于灵芝漆酶的研究尚不多见。国家知识产权局于2007年3月28日公开了一项发明专利申请“一种灵芝漆酶的清洁高效生成方法”(申请号200610096638.5)，该申请涉及一种灵芝漆酶的生产方法，该方法利用树舌灵芝ST(CCTCC NO.M206100)在含有玉米粉、粮食麸皮和花生饼粉的培养基中发酵5天，获得酶活为9000U/L的灵芝漆酶。国外也有关于利用灵芝生产漆酶的研究，如Trevor M等人利用Ganoderma adspersum液体发酵14天，获得酶活达34000U/L(ABTS法)的漆酶[Songulashvili G etal(2006)Biotechnol Lett28：1425-1429]。虽然上述方法利用灵芝发酵漆酶的产量有较大的提高，但是离产业化生产仍有相当的距离。

发明内容

本发明的目的是提供一种产漆酶的灵芝菌菌株。

本发明所提供的灵芝菌菌株是韦伯灵芝TZC1(Ganoderma weberianum TZC1)，已于2008年9月1日保藏于中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心(简称CGMCC)，保藏号为CGMCC No.2648。

本发明韦伯灵芝TZC1是从野生灵芝中分离出来的，经形态学和分子鉴定为韦伯灵芝Ganoderma weberianum(BRES&Henn.ex Sacc.)Steyarrt。依据《中国真菌志，第十八卷，灵芝科》(2000)、《中国药用真菌图鉴》(1987)和《中国灵芝图鉴》(2005)对本发明菌株进行形态学检验，其宏观特征和显微特征符合韦伯灵芝Ganoderma weberianum(BRES&Henn.exSacc.)Steyarrt种的特征范围。对从本发明菌株所产生的菌丝提取的DNA进行PCR扩增、测序和序列比对，结果表明韦伯灵芝TZC1的ITS序列(如SEQ NO.1所示)与韦伯灵芝的同源性达99.9％；但TZC1的Mn-SOD基因的部分序列(如SEQ NO.2所示)与韦伯灵芝的同源性仅为96％。