[发明专利]中国被毛孢菌粉生产方法有效
申请号: | 200810147785.X | 申请日: | 2008-11-29 |
公开(公告)号: | CN101423799A | 公开(公告)日: | 2009-05-06 |
发明(设计)人: | 涂峰;张玉业;李桂全;陈永凤;李树志 | 申请(专利权)人: | 涂峰 |
主分类号: | C12N1/14 | 分类号: | C12N1/14;C12M1/24;C12R1/645;C12R1/745;C12R1/79 |
代理公司: | 西宁金语专利代理事务所 | 代理人: | 哈庆华 |
地址: | 810008青海省西宁市五四西*** | 国省代码: | 青海;63 |
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摘要: | |||
搜索关键词: | 中国 被毛孢菌粉 生产 方法 | ||
技术领域
本发明涉及一种微生物的生产方法,特别涉及一种冬虫夏草中国被毛孢菌粉的生产方法。
背景技术
冬虫夏草是鳞翅目蝙蝠蛾属的虫草蝙蝠蛾(Hepialus armoricamus Oberthur)幼虫感染中国被毛孢真菌后,在体内大量繁殖后形成的虫菌复合体。中国专利CN97110448.4公开的中国冬虫夏草真菌的发酵生产方法,CN200410101728.X公开的冬虫夏草大规模发酵生产及菌粉加工工艺。上述两件专利均利用中国被毛孢菌种利用大型工业发酵罐逐级扩大繁殖的四级深层发酵方法生产出菌粉,其缺点是沿用了抗生素发酵模式,菌粉中培养基的化学物质易残留,环节复杂,污染机率大,设备投资大,风险大,生产周期长,得率低。一直以来,本领域技术人员从未考虑过不采用四级液体深层发酵生产冬虫夏草菌粉的方法,比如固体培养、液体静止培养或固液联合静止培养以缩短生产周期、降低投资风险、提高生产得率,而且技术人员对此种思路认为完全否定。
发明内容
本发明的目的是克服现有技术的不足和上述技术偏见,提供一种完全不同于以往生产冬虫夏草中国被毛孢生产菌粉的新方法。
本发明所需的菌种为:中国被毛孢(Hirsutella sinensis Liu,Guo,Yu et Zeng)。现保存在中国微生物保藏管理委员会普通微生物中心(CGMCC),保藏编号:CGMCCNo.2126,包藏日期:2007年8月6日。
本发明的技术解决方案是通过以下方法来实现的:一种中国被毛孢菌粉的生产方法包括如下步骤:
首先,将谷类10~50%、豆类0~10%、水50~70%按重量百分比配比后置入培养容器,培养基占培养容器体积的1/5~4/5,在120~130℃、0.15Mpa条件下灭菌20~40分钟,接入占培养基重量1%~4%的中国被毛孢菌种在0~14℃条件下培养2~5天培养基表面长满菌丝;
其次,在培养容器中补加占上述培养基重量20~40%的液体培养基,该培养基按重量百分比计蛋91~100%、奶0~0.9%、马铃薯0~0.9%、胡萝卜汁0~1.9%在0~14℃条件下培养3~8天;
最后,将培养物取出、干燥、粉碎即得中国被毛孢菌粉。
优选步骤是:步骤一:将谷类20~40%、豆类0~6%、水55~65%按重量百分比配比后置入培养容器,培养基占培养容器体积的2/5~4/5,在122~128℃、0.15Mpa条件下灭菌25~35分钟,接入占培养基重量2%~4%的中国被毛孢菌种在3~10℃条件下培养3~4天培养基表面长满菌丝;
步骤二:在培养容器中补加占上述培养基重量25~35%的液体培养基,该培养基按重量百分比计蛋93~98%、奶0.3~0.6%、马铃薯0.3~0.6%、胡萝卜汁0.5~1.5%在5~10℃条件下培养4~7天;
步骤三:将培养物取出、干燥、粉碎即得中国被毛孢菌粉。
最好采用的步骤是:步骤一:将谷类30%、豆类5%、水65%按重量百分比配比后置入培养容器,培养基占培养容器体积的3/5,在125℃、0.15Mpa条件下灭菌27分钟,接入占培养基重量3%的中国被毛孢菌种在6℃条件下培养3天培养基表面长满菌丝;
步骤二:在培养容器中补加占上述培养基重量30%的液体培养基,该培养基按重量百分比计蛋98%、奶0.5%、马铃薯0.5%、胡萝卜汁1%在8℃条件下培养5天;
步骤三:将培养物取出、干燥、粉碎即得中国被毛孢菌粉。
还可直接将谷类20~50%、豆类0~20%、水50~70%按重量百分比配比后置入培养容器,培养基占培养容器体积的1/5~4/5,在120~130℃、0.15Mpa条件下灭菌20~40分钟,接入占培养基重量1%~4%的中国被毛孢菌种在0~14℃条件下培养10~20天后取出培养物干燥、粉碎可得中国被毛孢菌粉。
也可将培养基按重量百分比计蛋91~100%、奶0~0.9%、马铃薯0~0.9%、胡萝卜汁0~1.9%、蛋白胨0~9%在120~130℃、0.15Mpa条件下灭菌20~40分钟,接入占培养基重量1%~4%的0~14℃条件下培养7~10天;
上述步骤一培养基中的水可用液体奶或含糖、蛋白质的液体代替,其中糖占液体总重量的1~10%,蛋白质占1~20%。
上述中国被毛孢菌粉的专用培养容器,最好采用食用级耐高温材质的容器(包括瓶塞),瓶底直径最好大于等于瓶口直径。
上述方法及培养容器还可用于冬虫夏草拟青霉、头孢菌及其他伴生菌粉的生产。
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