[发明专利]苔藓表达促进区域有效
申请号: | 200810131111.0 | 申请日: | 2004-07-30 |
公开(公告)号: | CN101555479A | 公开(公告)日: | 2009-10-14 |
发明(设计)人: | M·罗德里格斯-佛朗哥;W·约斯特;A·威斯;G·戈尔 | 申请(专利权)人: | 格里革新生物技术有限公司 |
主分类号: | C12N15/29 | 分类号: | C12N15/29;C12N15/82;C12N5/10;C12P21/00;C07K14/415;C12Q1/68 |
代理公司: | 中国国际贸易促进委员会专利商标事务所 | 代理人: | 罗菊华 |
地址: | 德国*** | 国省代码: | 德国;DE |
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摘要: | |||
搜索关键词: | 苔藓 表达 促进 区域 | ||
1.SEQ ID NO:24的序列所示的分离的核酸分子,其是野生型细胞核来源的苔藓表达促进区域。
2.权利要求1的分离的核酸分子,其特征在于它还包含苔藓启动子。
3.权利要求1的分离的核酸分子,其特征在于它还包含5′UTR区域和/或5′内含子和/或3′UTR。
4.权利要求1的分离的核酸分子,其特征在于它还包含重组多肽产物的编码区,所述的编码区在苔藓表达促进区域的控制下。
5.权利要求1的分离的核酸分子,其特征在于它还包含选择标记。
6.权利要求1的分离的核酸分子,其特征在于它还包含与将要用其转化的物种的基因组序列同源的序列,以使在该物种中靶向整合。
7.在真核宿主细胞中表达重组多肽产物的方法,包括以下的步骤:
(1)提供重组DNA克隆载体,该载体包含根据权利要求1到6中任何一项的分离的核酸分子;
(2)转化所述的真核宿主细胞,该细胞在天然情况下不含有在苔藓表达促进区域控制下的所述重组多肽产物的编码区域;
(3)在适宜的培养基中培养转化的真核宿主细胞;
(4)表达所述的重组多肽;以及
(5)分离表达的重组多肽。
8.权利要求7的方法,其特征在于所述的真核宿主细胞选自植物细胞。
9.权利要求7的方法,其特征在于所述的真核宿主细胞选自苔藓细胞。
10.权利要求7的方法,其特征在于所述的真核宿主细胞选自小立碗藓细胞。
11.权利要求7的方法,其中所述重组DNA克隆载体还包含所述重组多肽产物的编码区域,所述编码区域在所述宿主中在苔藓表达促进区域的控制下。
12.权利要求11的方法,其特征在于所述真核宿主细胞选自植物细胞。
13.权利要求11的方法,其特征在于所述真核宿主细胞选自苔藓细胞。
14.权利要求11的方法,其特征在于所述真核宿主细胞选自小立碗藓细胞。
15.权利要求7-14中任一项的方法,其特征在于所述的宿主细胞是原丝体苔藓组织细胞。
16.权利要求7-14中任何一项的方法,其特征在于培养基不含有向其中添加的植物激素。
17.权利要求7到9、11到13中任何一项的方法,其特征在于细胞选自来自立碗藓属、葫芦藓属、泥炭藓属、角齿藓属、地钱属以及Sphaerocarpos的苔藓细胞。
18.权利要求7到14中任何一项的方法,其特征在于宿主细胞瞬时表达所述的重组多肽产物。
19.权利要求1到6中任何一项的分离的核酸分子的用途,用于在工业上制备多肽。
20.权利要求1到6中任何一项的分离的核酸分子的用途,用于在工业上提供制备多肽的重组细胞。
21.权利要求1到6中任何一项的分离的核酸分子的用途,用于表达苔藓多肽,所述苔藓多肽的表达在天然情况下不由苔藓表达促进区域控制。
22.权利要求1到6中任何一项的分离的核酸分子的用途,用于提供表达苔藓多肽的重组苔藓细胞,所述苔藓多肽的表达在天然情况下不由苔藓表达促进区域控制。
23.权利要求1到6中任何一项的分离的核酸分子的用途,用于筛选和确定表达促进区域的共有序列。
24.权利要求1到6中任何一项的分离的核酸分子的用途,用于经过翻译后修饰的蛋白的重组表达。
25.权利要求1到6中任何一项的分离的核酸分子的用途,用于体外表达重组蛋白。
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