[发明专利]一种抑制肿瘤坏死因子α活性的皂苷、其制法及医药用途

说明书

技术领域

本发明涉及天然药物领域，具体涉及一种从中药威灵仙中提取分离得到的一种皂苷，该皂苷具有抑制肿瘤坏死因子α(TNF-α)活性的功效。

本发明的研究得到国家自然科学基金项目资助，项目号：3077270。

背景技术

肿瘤坏死因子α(Tumor necrosis factor α，TNF-α)是由单核细胞、巨噬细胞或淋巴细胞分泌产生的一种多功能细胞因子，介导多种生物学活性。正常水平的TNF-α可以参与抵抗细菌、病毒和寄生虫的感染，促进组织的修复，引起肿瘤细胞凋亡等，但TNF-α在体内的大量产生和释放则会破坏机体的免疫平衡，与其它炎症因子一起产生多种病理损伤，如恶病质和败血症休克所致的多器官功能衰竭、类风湿性关节炎(Rheumatoid Arthritis，RA)、糖尿病、多发性硬化症(MS)、炎症性肠病(IBD)、移植物抗宿主病(GVHD)和骨髓造血紊乱综合症(MDS)等多种疾病。因此，应用TNF-α抑制剂降低这些疾病中的TNF-α水平，为这些疾病的治疗提供了一种新的途径，因而对于TNF-α活性抑制剂的研究成为当前研究的热点之一。

威灵仙为我国药典收载品种，其药材来源为毛茛科植物威灵仙Clematis chinensis Osbeck，棉团铁线莲Clematis hexapetala Pall.或东北铁线莲Clematis manshurica Rupr.的干燥根及根茎。秋季采挖，除去泥沙，晒干。具有祛风除湿，通络止痛。用于风湿痹痛，肢体麻木，筋脉拘挛，屈伸不利，骨哽咽喉等症，这几种植物中均富含三萜皂苷类成分，现已从其中分离鉴定出六十几种齐墩果烷型三萜皂苷，其苷元主要为齐墩果酸和常春藤苷元等。

发明内容

本发明公开了一类从威灵仙中分离得到的皂苷，其苷元为较少见的21-α-羟基-齐墩果酸。其结构如下：

R₁、R₂、R₃各自独立地代表H或为一个葡萄糖基和一个鼠李糖基相连的基团，并且R₁、R₂、R₃中有两个同时代表H，另一个代表一个葡萄糖基和一个鼠李糖基相连的基团，即

当R₁和R₂为H时，R₃为一个葡萄糖基(-glc)和一个鼠李糖基(-rha)相连，他们可以任一种可能连接的方式相连；

当R₁和R₃为H时，R₂为一个葡萄糖基(-glc)和一个鼠李糖基(-rha)相连；

当R₂和R₃为H时，R₁为一个葡萄糖基(-glc)和一个鼠李糖基(-rha)相连。即与苷元3-OH相连的--rha2-glc-2和glc-1可以是1-4位、1-2位、1-3位或1-6位连接。

优选的皂苷结构是：

上述优选的皂苷I的分子式为：C₈₂H₁₃₄O₄₄，分子量为：1822，熔点：235.5-238.5℃。

化学名为：3-β-[(O-α-L-rhamnopyranosy-(1→6)-O-β-D-glucopyanosyl-(1→4)-O-β-D-glucopyanosyl-(1→4)-O-β-D-ribopyranosyl-(1→3)-α-L-rhamnopyranosyl-(1→2)-α-L-arabinopyranosyl)oxy]-21α-hydroxyolean-12-en-28-oic acid-O-α-L-rhamnopyranosyl-(1→4)-β-D-glucopyanosyl-(1→6)-β-D-glucopyanosyl ester。

本发明的威灵仙皂苷可以用以下方法制备：

本发明中威灵仙药材优选来源于毛茛科植物威灵仙Clematis chinensis Osbeck，棉团铁线莲Clematis hexapetala Pall.或东北铁线莲Clematis manshurica Rupr.的干燥根及根茎。

取威灵仙药材，以20-90％乙醇回流提取，提取液减压浓缩，高速离心或过滤，滤液上大孔树脂吸附后，依次用水、20-40％乙醇液、50-70％乙醇液洗脱至流出液无色，收集50-70％乙醇洗脱液，减压蒸干，得威灵仙总皂苷，威灵仙总皂苷再经硅胶和反相填料(如ODS，C₈)柱进一步分离，即得。