[发明专利]南方红豆杉中紫杉醇生物酶解法提取工艺

说明书

技术领域

本发明属于从植物中提取活性成分技术领域，具体涉及南方红豆杉中紫杉醇生物酶解法提取工艺。

背景技术

紫杉醇具有良好的抗癌活性，尤其对晚期、转移性卵巢癌、乳腺癌、肺癌有十分显著的疗效，对宫颈癌、食管癌、胃癌、膀胱癌、恶性黑色素瘤、恶性淋巴瘤亦有疗效。目前提取红豆杉紫杉醇的技术主要有化学法(包括溶剂浸泡、酸降解、碱降解等方法。这类方法的缺点是往往导致有效成分变性，产品中的有害残留较高且难以去除)、物理法(使用低温、冷冻(脆化)、超声波、微波等物理作用破坏灵芝孢子壁，缺点是有效物质很难提取充分，且设备昂贵)、机械法(通过碾压、挤压、喷射粉碎、气流粉碎、撞击等机械作用破坏细胞壁，缺点同物理法一样，但设备造价较低)。

由于红豆杉细胞组织中具有一层坚硬的细胞壁外壳，且紫杉醇通常状态下表现为脂溶性物质，因此采用常规方法难以使植物细胞充分破壁，且必须使用有机溶剂，普遍存在提取时间长、收率低、产品含有机物残留。

发明内容

本发明的目的是提供一种南方红豆杉中紫杉醇生物酶解法提取工艺，该方法对紫杉醇提取充分、提取效率高、工艺简单、成本低、无环境污染。

本发明的提取方法特征是以南方红豆杉枝叶为原料，以类酵母菌的D426为酶解微生物，在32-36℃条件下进行酶解，再经过瞬间冷冻、高速分离、喷雾干燥，得到高含量紫杉醇。

上述酶解过程中的酶解微生物是以其活性菌体粉加入的，其制备方法为将类酵母菌的D426置于菌种培养基斜面培养菌种，菌种培养基为肉汤琼脂，而后由石腊油封存，3个月后再移植封存，加大培养基溶液，使其扩群，然后取其浮生藻冻干成活性菌体粉。

本发明通过选用特定的微生物菌株对红豆杉进行酶解，使植物细胞充分破壁，并对其分子结构中的憎水基进行有效的包容，在不改变其他官能团的前提下，使其具有亲水性质，因而能够以水为溶剂在酶解后直接进行提取，解决了分子破壁和憎水性的技术难题。与现有技术相比，一级提取率高达96％、无有机溶剂残留、无环境污染。

具体实施方式

实施例1

称取清洗后红豆杉的枝叶1000公斤，经打浆榨汁，掺入150克微生物活性菌体粉，搅拌均匀并在温度为32℃条件下静置5天，瞬间低温浓缩至25公斤，然后经过高速离心分离、喷雾干燥获得粉状干物质755.6克，按照江西德宇集团企业标准(Q/JDY01-2007)方法，测得其紫杉醇的含量为1.63％。

实施例2

称取清洗后红豆杉的枝叶1000公斤，经打浆榨汁，掺入150克微生物活性菌体粉，搅拌均匀并在温度为34℃条件下静置5天，瞬间低温浓缩至25公斤，然后经过高速离心分离、喷雾干燥获得粉状干物质798.4克，按照江西德宇集团企业标准(Q/JDY01-2007)方法，测得其紫杉醇的含量为1.53％。

实施例3

称取清洗后红豆杉的枝叶1000公斤，经打浆榨汁，掺入150克微生物活性菌体粉，搅拌均匀并在温度为36℃条件下静置5天，瞬间低温浓缩至25公斤，然后经过高速离心分离、喷雾干燥获得粉状干物质853.6克，按照江西德宇集团企业标准(Q/JDY01-2007)方法，测得其紫杉醇的含量为1.42％。