[发明专利]大孔吸附树脂技术纯化小叶榕叶黄酮类化合物的方法

说明书

技术领域

本发明属于一种大孔吸附树脂技术纯化小叶榕叶黄酮类化合物的方法。

背景技术

小叶榕为桑科植物榕树Ficus microcarpa L.f.，异名落地金线。小叶榕叶主要含黄酮、三萜类、鞣质、脂肪族化合物和甾体化合物等，入药主用其叶。用其浸膏作为主要成分的哮喘和慢性支气管炎治疗药咳特灵胶囊已收藏在部颁标准中。小叶榕叶中黄酮类等有效成分对治疗冠心病、老年性痴呆、脑血栓、神经系统疾病和消除自由基、抗炎、抑菌、抗癌等方面都有显著的效果，无毒副作用，并以此开发出多种药品和保健食品。因此，小叶榕叶黄酮具有良好的开发前景。

关于小叶榕叶黄酮类化合物的提取分离技术已有不少报道，主要有水浸提、乙醇回流提取、超声波提取等，这些方法的提取率一般为4.12％，总黄酮含量15％-18％。由于总黄酮含量不高，制约了其药效的发挥。本发明采用小叶榕叶水提物浸膏作为原料液，经过大孔吸附树脂技术纯化后，可使黄酮含量提高到50％以上，达到中药五类新药的要求。

发明内容

本发明要解决的技术问题是提供一种利用大孔吸附树脂技术，纯化小叶榕叶黄酮类化合物、保证小叶榕叶的有效成分发挥更好药效的方法。

本发明以如下技术方案解决上述技术问题：

纯化方法为：

(1)将小叶榕叶水提物浸膏按1∶20～1∶200(g/ml)溶于去离子水中，待充分溶解后减压抽滤，除去水不溶成分；

(2)用醋酸水溶液和氢氧化钠或氢氧化钾水溶液调节pH值至1.0～10.0；

(3)在瓶中静态吸附、解吸或上大孔吸附树脂柱动态吸附，再用乙醇-水组合动态洗脱，控制吸附速度和洗脱速度；

(4)收集各解吸液或洗脱液，减压浓缩，得高黄酮含量的小叶榕叶浸膏。

大孔吸附树脂型号包括DM130，AB-8，D101，DM301，X-5五种。

用本发明方法生产的小叶榕叶浸膏，为黑色黏稠膏状，总黄酮含量大于50％，较现有小叶榕叶浸膏黄酮含量提高三倍以上，可直接入药。且生产成本低，安全无毒副作用，为工业化生产提供了必要的条件，将使医药企业获得显著的经济效益和社会效益。

具体实施方式

大孔吸附树脂法明显的好处是不需要复杂的设备，处理方法简单，树脂可再生，树脂再生所用的酸和碱可互相中和，对环境造成的危害小，制备的成本较低，制备方法容易得到推广。

本发明的方法将预处理或再生后的大孔树脂装柱(或放置瓶中)，用树脂柱(或瓶中树脂)对小叶榕叶水提物浸膏中水溶解完全的部分进行吸附，待吸附充分后，用乙醇-水洗脱，分别收集过柱后的吸附液和解吸液，减压浓缩，溶剂可以回收再利用。

本发明采用的主要原料小叶榕叶水提物浸膏，是采用现有技术由小叶榕叶经水浸提工艺得到的产品，其含水量一般不超过35.6％。

本发明的具体工艺是：

(1)称取定量的小叶榕叶水提物浸膏，加入去离子水溶解。浸膏与去离子水的比例为1∶20～1∶200(g/ml)；室温静置3h～6h分层后减压抽滤，加水静置分层1～5次，合并滤液，即得吸附液；

(2)加入醋酸水溶液和氢氧化钠或氢氧化钾水溶液调节经(1)所得的吸附液pH值。醋酸水溶液浓度可为10％～95％，氢氧化钠或氢氧化钾水溶液的重量百分比浓度为4％～20％。吸附液pH为1.0～10.0；

(3)采用大孔吸附树脂静态吸附、解吸时，大孔吸附树脂用量与吸附液用量之比为1∶2～1∶200(g/ml)，放置恒温摇床震荡，温度0℃～80℃，震荡速度40～200(rad/min)，吸附、解吸时间0.1h～24h；

(4)若采用大孔吸附树脂柱进行动态吸附，大孔吸附树脂柱径高比为1∶1～1：30，树脂用量与吸附液用量比为1∶2～1：200(g/ml)，吸附次数1～5次，控制吸附速度1～20(ml/min)，吸附时间0.1h～7h；

(5)用乙醇水溶液洗脱。加入醋酸水溶液和氢氧化钠或氢氧化钾水溶液调节洗脱液pH值为1.0～10.0，洗脱液乙醇浓度为10％～95％，洗脱液用量为吸附液用量的0.1～3倍，洗脱速度1～20(ml/min)，洗脱时间0.1h～3.5h。

(6)利用紫外分光光度法，在500nm处，以芦丁标准液为对照，测定各样品原液、吸附液、洗脱液的黄酮浓度。分别精确移取各样品原液、洗脱液1ml～50ml浓缩至干，计算黄酮纯度和提取率。

(7)分别收集各段洗脱液(解吸液)，减压浓缩，得高黄酮含量的小叶榕叶浸膏。

实施例1：