[发明专利]改进的免疫荧光细胞染色方法无效
申请号: | 200810069979.2 | 申请日: | 2008-07-14 |
公开(公告)号: | CN101329230A | 公开(公告)日: | 2008-12-24 |
发明(设计)人: | 倪兵;赵韧;吴玉章;许桂莲;王庆红;付小岚;贾正才;王靖雪;李健;石晶磊;黄泽民;田易;田志强 | 申请(专利权)人: | 中国人民解放军第三军医大学 |
主分类号: | G01N1/30 | 分类号: | G01N1/30;G01N33/533 |
代理公司: | 北京同恒源知识产权代理有限公司 | 代理人: | 赵荣之 |
地址: | 400038重*** | 国省代码: | 重庆;85 |
权利要求书: | 查看更多 | 说明书: | 查看更多 |
摘要: | |||
搜索关键词: | 改进 免疫 荧光 细胞 染色 方法 | ||
1.改进的免疫荧光细胞染色方法,包括以下步骤:
a、固定/通透:在分离的细胞沉淀中,加入固定/通透液,混匀,于温度2-8℃避光孵育30-60分钟;
b、通透:在经步骤a固定/通透处理后的细胞悬液中,加入通透液,离心洗涤细胞,弃上清;
c、表面染色和核内染色:在经步骤b通透处理后的细胞沉淀中,加入细胞表面抗原的荧光标记抗体和核内抗原的荧光标记抗体,于温度2-8℃避光孵育至少30分钟;同时设阴性同型对照;
d、洗涤:在经步骤c染色处理后的细胞悬液中,加入通透液,离心洗涤细胞,弃上清;
e、重悬:在经步骤d洗涤处理后的细胞沉淀中,加入流式细胞术染色液,重悬细胞。
2.根据权利要求1所述的改进的免疫荧光细胞染色方法,其特征在于:所述染色细胞为调节性T细胞;所述步骤c细胞表面抗原的荧光标记抗体选自荧光标记的抗CD4抗体或抗CD25抗体,或用不同颜色荧光标记的抗CD4抗体和抗CD25抗体;所述步骤c细胞核内抗原的荧光标记抗体选自荧光标记的抗Foxp3抗体。
3.根据权利要求1或2所述的改进的免疫荧光细胞染色方法,其特征在于:所述步骤a和步骤c的孵育温度优选地为4℃,孵育时间优选地为30分钟。
该专利技术资料仅供研究查看技术是否侵权等信息,商用须获得专利权人授权。该专利全部权利属于中国人民解放军第三军医大学,未经中国人民解放军第三军医大学许可,擅自商用是侵权行为。如果您想购买此专利、获得商业授权和技术合作,请联系【客服】
本文链接:http://www.vipzhuanli.com/pat/books/200810069979.2/1.html,转载请声明来源钻瓜专利网。
- 上一篇:治疗胃脘痛类的口服药物
- 下一篇:微结构光纤传感探头