[发明专利]一种脂质体流感疫苗

权利要求书

1.一种脂质体流感疫苗，其特征在于：所述脂质体的膜带有电荷，所述流 感疫苗的抗原组分包裹于脂质体内或镶嵌于脂质体膜中或由于电荷而吸附 于膜上；所述流感疫苗包括全病毒灭活流感疫苗，流感裂解型疫苗和流感 亚单位疫苗；所述流感疫苗抗原组分包括流感病毒的血凝素(HA)和神经氨 酸酶(NA)；所述血凝素(HA)和神经氨酸酶(NA)包括H1N1。

2.根据权利要求1所述的脂质体流感疫苗，其特征在于：所述血凝素(HA) 和神经氨酸酶(NA)还包括H3N2、B中的至少一种。

3.根据权利要求2所述的脂质体流感疫苗，其特征在于：所述脂质体流感 疫苗单位剂量中含流感疫苗HA及NA组分的量是5ug-100ug。

4.根据权利要求3中所述的脂质体流感疫苗，其特征在于：所述流感疫苗 还包含免疫调节剂或附加剂。

5.根据权利要求4中所述的脂质体流感疫苗，其特征在于：所述免疫调节 剂为细胞因子类蛋白，包括干扰素(IFN-α、IFN-β、IFN-γ)，白介素(IL-1、 IL-2、IL-4、IL14、IL16)、胸腺肽α1、免疫核糖核酸。

6.根据权利要求5中所述的脂质体流感疫苗，其特征在于：所述脂质体为 小单层和大多层脂质体共存的脂质体。

7.根据权利要求6所述的脂质体流感疫苗，其特征在于：所述脂质体球径 为50～5000nm。

8.根据上述1-7中任意一个权利要求所述的脂质体流感疫苗的制备方法， 其特征在于：采用冻干水化法，包括如下步骤：

1)将脂质体膜材及附加剂，免疫调节剂以摩尔比(5-10)∶(1-7)∶(1-5)溶 于溶媒中，置于旋转蒸发器中，除去有机溶媒，旋转蒸发形成磷脂膜；

2)加入缓冲液，40-60℃，超声10-20分钟，形成脂质体悬液；

3)将脂质体悬液与流感疫苗抗原溶液混合，脂质体粉碎均匀，加入冷冻保 护剂，进行冷冻干燥；

4)灭菌：得到冻干粉剂；加无菌水、震荡、再水化融合；得到脂质体流感 疫苗。

9.根据权利要求8所述的脂质体流感疫苗的制备方法，其特征在于：

所述步骤1)中的溶媒为二氯甲烷溶液或氯仿溶液；

所述步骤2)中的缓冲液为pH值为5.4-7.8范围内的磷酸缓冲液、Tri-HCl 缓冲液、碳酸钠缓冲液或NaCl溶液。

10.根据上述1-7中任意一个权利要求所述的脂质体流感疫苗的制备方法， 其特征在于：采用逆相蒸发法，包括如下步骤：

1)将脂质体膜材和附加剂，免疫调节剂以摩尔比(5-10)∶(1-7)∶(1-5)溶 于溶媒中，加入流感疫苗抗原溶液，35-60℃，超声处理10-20分钟，得到 稳定的油包水乳液；

2)在40-60℃下减压蒸发，得到胶态物质；

3)加入缓冲液，40-60℃旋转蒸发，减压蒸发10-20分钟，除去微量有机 溶媒，得到脂质体水性混悬液，放置20-40分钟，透析，除去游离的未包 入脂质体的流感抗原；

4)灭菌；得到脂质体流感疫苗。

11.根据权利要求10所述的脂质体流感疫苗的制备方法，其特征在于：

所述步骤1)中的溶媒为二氯甲烷溶液或氯仿溶液；

所述步骤2)中的缓冲液为pH值为5.4-7.8范围内的磷酸缓冲液、Tri-HCl 缓冲液、碳酸钠缓冲液或NaCl溶液。