[发明专利]含极性基团的吸附树脂制备方法及该树脂在延胡索总生物碱纯化中的应用

说明书

【技术领域】：

本发明涉及中药有效成分的提取和分离技术领域，特别是延胡索乙素的提取方法，及该方法中所使用的吸附树脂的制备。

【背景技术】：

延胡索(Corydalis yanhusuo W.T.Wang.)为罂粟科植物延胡索的干燥块茎，其味辛、苦，性温，具有活血化淤、理气止痛的功效。临床用于治疗胸腹疼痛，肢体疼痛，疝痛，痛经。可单味使用，也可配伍其它药物煎服。现代药理学研究表明，延胡索具有抗溃疡、抑制胃酸分泌、解痉及增加冠状动脉血流量，抗心律失常等作用。延胡索中主要活性成分为异喹啉类生物碱，包括延胡索甲素、延胡索乙素、原阿片碱、四氢黄连碱等，其中延胡索乙素(Tetrahydropalmatine)是主要有效成分，其结构如下图所示。本发明中以延胡索乙素在提取物中的含量考察总生物碱的纯度。

研究表明，延胡索乙素具有镇痛、镇静的作用。延胡索乙素的镇痛作用比解热镇痛药强。对慢性持续性疼痛及内脏钝痛的效果较好。在发挥镇痛作用同时，还有镇静催眠作用。近年来发现还有降压、抗心率失常、抗血栓、钙拮抗、抑制胃酸分泌等药理作用(徐婷，金昔陆，曹惠明，延胡索乙素药理作用的研究进展，中国临床药学杂志，2001，10(1)：58-60)。

在当前的研究中，常采用索氏提取、回流提取、超临界萃取以及微波提取等方法进行延胡索乙素的提取。包玮鸳等采用超临界CO₂流体萃取法从延胡索中萃取延胡索乙素，并对试验条件进行了优化(包玮鸳，吴立成，何忠平等，超临界CO₂流体萃取法提取延胡索乙素，中药材，2004，27(7)：501-503)。程建明等以提取液的得膏率以及延胡索乙素的含量为指标，考察了索氏提取、超临界流体、微波提取等方法的提取效果，认为超临界流体最适于延胡索乙素的提取(程建明，井山林，延胡索中延胡索乙素不同提取方法的比较研究，时珍国医国药，2006，17(7)：1236-1237)。但超临界流体萃取法成本较高，一次性设备较大，不适合大规模的工业化生产。张丽筑等研究表明用大孔吸附树脂法提取延胡索生物碱浸膏率较高，不使用有毒溶剂，污染小，并且树脂可再生，使用简便，是一种值得推广的方法(张丽筑，朱珠，郝小燕，延胡索生物总碱两种提取方法的比较，贵阳医学院学报，2006，31(3)：280-282)。目前用于中草药有效成分提取的树脂多是全聚苯乙烯型或者含有少量的弱极性基团的吸附树脂。此类树脂的疏水作用力很强，对有效成分和杂质的选择性较差。我们期望合成一种含有极性基团的聚苯乙烯型吸附树脂，并将其应用于从延胡索中制备延胡索乙素。

【发明内容】：

本发明的目的是解决现有延胡索中延胡索乙素提取方法对有效成分和杂质的选择性较差、成本高及不适合大规模工业化生产的问题，提供一种含极性基团的吸附树脂制备方法及该树脂在延胡索总生物碱纯化中的应用。

本发明提供的含极性基团的吸附树脂的制备方法，通过以下步骤实现：

第一、在常温下，将明胶或聚乙烯醇溶解于水中，配成质量百分含量为0.5％～5％的水相溶液；

第二、以质量百分含量3％～10％的丙烯酸甲酯、30％～60％的苯乙烯及余量为二乙烯苯组成单体相，向单体相中加入长链烷烃作为致孔剂，其质量为单体相质量的80～100％，与单体相共同组成油相；将第一步中的水相溶液加热至30～50℃，加入上述油相，水相与油相体积比为3∶1；

第三、向上步混合液中加入用量为总单体相质量的1～3％的偶氮二异丁氰作为引发剂；在悬浮聚合过程中，先升温至60～80℃反应2～6小时，再继续升温至85～90℃反应3小时；最后经过滤、洗涤处理后得到含极性基团的吸附树脂。

上述方法制备的吸附树脂的应用，用于从延胡索中制备延胡索乙素，具体步骤如下：

第一步、将延胡索粉碎，用70～85％乙醇加热回流1～2小时，重复提取1～3次；

第二步、将上步提取液转入水溶液中，调PH值到3～4，过滤得澄清水溶液；

第三步、将权利要求1制备的吸附树脂装入吸附柱中，吸附柱的径长比为1∶5～1∶20；

第四步、将第二步转成水相后的溶液以0.5～3.0BV/h的流速通过树脂吸附柱，其中延胡索乙素被有效地吸附在树脂柱上；

第五步、用2～3BV水清洗树脂床层，然后依次用2～4BV的体积百分含量50～60％的乙醇水溶液、2～5BV醋酸体积百分含量3～8％和乙醇体积百分含量75～90％的醋酸-乙醇水溶液分步洗脱，流速为0.5～3BV/h；