[发明专利]免疫牛初乳与双歧杆菌复合微胶丸的制备方法

说明书

技术领域

本发明涉及一种利用双歧杆菌发酵免疫牛初乳后通过真空冷冻干燥、悬浮造粒和肠溶包膜制备具有良好的免疫与微生态调节双重活性复合微胶丸的方法。

背景技术

19世纪末，人类开始认识双歧杆菌和免疫乳。经过1个多世纪的研究与实践，人类已经了解并掌握了二者的基本特性，并已开发出多种产品。

双歧杆菌是人类肠道内主要的有益菌群，可以抑制有害菌群的生长繁殖，促进机体新陈代谢，增强机体抵抗能力，调节人体内微生态平衡，已应用于医疗保健药品和食品。双歧杆菌产品在日本和欧美等国家非常盛行，目前国外已开始采用高密度培养、真空冷冻干燥、肠溶微胶囊等技术生产各种双歧杆菌微生态制剂，如益生菌(Probiotics)制剂、益生元(Prebiotics)制剂、合生素(Synbiotics)制剂等。我国双歧杆菌乳制品的发展起步较晚，90年代才开始对双歧杆菌酸奶进行研究，主要是双歧杆菌系列酸“益生菌”酸奶，以及丽珠肠乐、回春生、菲康、金双歧、“法国合生元益生菌”等微生态制剂。虽然在这些制剂中，双歧杆菌的活菌数达到10⁸cfu/g，但制剂生产过程中没有经过包埋和缓释技术处理，因此制剂在保藏过程中会出现活菌数与稳定性降低，服用过程中胃肠通过率极低等现象，严重影响了产品的保健功能。

对于免疫乳的研究国外起步较早，从20世纪50年代开始，科学家就着手研究通过免疫乳来防治人类的疾病。如Mainer、Sheridan等人研制抗轮状病毒的免疫乳，Biokema、Mietns等人研制抗大肠杆菌的免疫乳，Tacket等人研制抗福氏志贺氏菌的免疫乳，以及抗其它肠道病原菌及非肠道疾病的免疫乳，并取得了相当好的临床结果。另外，国外的学者对免疫球蛋白的特性进行了大量的研究，如Mainer、David、Tyler等人研究发现当温度超过65℃，乳中免疫球蛋白的活性被破坏；Hipert通过免疫电泳表明，免疫球蛋白经过胃蛋白酶和胰蛋白酶消化后，仍可保持一定的活性；胃酸对免疫球蛋白的破坏作用较大。目前国外已采用超滤、超高压、微胶囊技术对各种免疫乳制品进行研究，得到的产品稳定性较好，胃肠通过率较高。但国内开发出的免疫乳类产品种类较少，主要是以普通牛初乳为原料生产出的牛初乳类干粉产品，特异性免疫球蛋白的产品还未见有生产，而且这些产品在生产过程中主要应用热杀菌、喷雾干燥等技术，产品中免疫球蛋白的免疫活性损失较大，保藏稳定性较低，胃肠通过率低于10％。

本发明专利是以高活性免疫牛初乳和高密度培养的双歧杆菌为原料，采用高密度培养、超高压、真空冷冻干燥、悬浮造粒和肠溶包膜技术制备免疫与微生态调节双重活性的复合肠溶微胶丸。该制剂不仅有效保持高免疫和微生态调节双重活性，而且具有较强的耐酸和抗消化酶特性，肠道内释放效果良好。

发明内容

本发明提供一种利用双歧杆菌发酵免疫牛初乳后通过真空冷冻干燥、悬浮造粒和肠溶包膜制备复合微胶丸的方法，旨在解决在生产、使用过程中免疫牛初乳与双歧杆菌的活性、数量及效价显著降低的问题。

本发明采取的技术方案是：

1、双歧杆菌发酵免疫牛初乳的制备：

选取距离预产期6～8周的健康预产奶牛作为免疫对象，进行人体肠道内有害菌(如致病性大肠杆菌、沙门氏菌、志贺氏菌等)免疫，收集该母牛分娩后1～3d的乳汁即为免疫牛初乳；所得免疫牛初乳经离心脱脂、超高压杀菌后接种双歧杆菌，离心脱脂条件为3000～5000rpm，5～15min，使脱脂后免疫牛初乳中脂肪质量含量为0.8～1.2％，超高压杀菌条件为300～800MPa，保压2～20min，接种量为1～10％体积浓度，培养4～24h，使双歧杆菌活菌数量达到10⁹cfu/mL以上，免疫球蛋白效价≥2¹⁰，获得双歧杆菌发酵免疫牛初乳；

2、免疫牛初乳与双歧杆菌复合冻干粉的制备：

在双歧杆菌发酵免疫牛初乳中添加0.1～10％质量浓度的蔗糖和0.4～40％质量浓度的甘露醇(蔗糖和甘露醇作为冻干保护剂使用)，控制料液的厚度处于5～20mm范围内，先在-80～-20℃温度范围内预冻1～10h，使料液中心达到预冻温度；然后进行冻干，冻干过程中采用搁板导热的加热方式，冻干压力为1～50Pa，搁板温度控制在0～30℃以下，冻干时间6～16h；所制得的免疫牛初乳与双歧杆菌复合冻干粉，其中活菌数量达到10¹⁰cfu/g干粉以上，免疫球蛋白效价≥2⁹；

3、免疫牛初乳与双歧杆菌复合微胶丸的制备：