[发明专利]一种鉴别龙眼肉质量的高效液相色谱检测方法

权利要求书

1.一种鉴别龙眼肉质量的高效液相色谱检测方法，其特征是：先对供试样品进行剪碎研磨处理，供试样品为新鲜龙眼果肉或制成的龙眼干，然后加水用超声波提取，提取物经微孔膜过滤后，用已建立的高效液相色谱标准测定方法进行测定，得供试样品色谱图，将供试样品色谱图与标准龙眼肉色谱图相比较，以此对供试样品真假作出科学的评价；标准龙眼肉色谱图是按照10种核苷标准品的分离方法建立的。

2.根据权利要求1所述的高效液相色谱检测方法，其特征是在利用高效液相色谱测定技术时，所采用的色谱条件为：Nucleosil C18反相水性柱5μm，250mm×4mm；流动相为0.005mol/L的KH₂PO₄和甲醇；二元梯度洗脱，流速1mL/min；检测波长260nm，柱温35℃。

3.根据权利要求1或2所述的高效液相色谱检测方法，其特征是所述的高效液相色谱检测方法，具体是采用包括以下步骤的方法：

(1)核苷类成分标准样品的分离：

准确称取各标准样品2.5mg，精确至0.00001g，用水溶解并定容到5mL，混合标准样品溶液用水稀释至50μg/mL，以后呈2倍稀释，做标准曲线；然后用色谱条件进行10种标准样品的分离，得到10种标准样品色谱图；10种标准样品分别是胞嘧啶、尿嘧啶、胞苷、次黄嘌呤、尿苷、胸腺嘧啶、次黄嘌呤核苷、鸟苷、胸苷和腺苷；

(2)供试杆品的处理：

A.将采集的新鲜龙眼去皮和核，于-20℃存放，备用；称取备用龙眼果肉0.9～1.1g，精确到0.001g；再经剪碎研磨处理后移入25mL容量瓶中，加入10～15mL的水，进行两次超声波处理；然后，用水定容至刻度，进样前用微孔过滤膜过滤，

或者，

B.将采集的新鲜龙眼果肉制成半干型龙眼干，龙眼干经70℃烘干至恒重后，称取0.32g精确到0.0001g，龙眼肉的干：湿为1∶5.8～6.5；再剪碎研磨处理后移入25mL容量瓶中，加入14～16mL的水，浸泡3小时，超声波处理30分钟后定容至刻度，进样前用微孔过滤膜过滤；

(3)供试样品色谱图的建立：

将处理后的供试样品进行高效液相色谱分析，每个样品重复3次；在所选定的色谱条件下，供试样品得到满意的分离，得到多种水溶性物质，其中有7种以上的核苷；并且所建立的供试样品色谱图含有多个峰，较大的峰有6个，其中腺苷、鸟苷、尿苷的峰较高或者峰面积较大时，即表示这三种核苷的含量也较高；然后根据标准曲线和峰值，计算出这三种核苷的含量；

(4)比较：

将供试样品色谱图与按上述同样步骤已建立的标准龙眼肉色谱图进行对比，利用腺苷、鸟苷和尿苷是标准龙眼果肉样品中较稳定的核苷类特征性物质来鉴别供试样品的真伪。

4.根据权利要求3所述的高效液相色谱检测方法，其特征是：步骤(2)所述的两次超声波处理，其中，第一次超声波处理为20分钟，停止10分钟后再进行第二次超声波处理，时间为10分钟。

5.根据权利要求3所述的高效液相色谱检测方法，其特征是：步骤(2)所述的微孔过滤膜为0.5μm微孔过滤膜。

6.根据权利要求3所述的高效液相色谱检测方法，其特征是：步骤(2)所述的新鲜龙眼肉取自广东省农业科学院果树研究所果园，包括供试样品和标准龙眼果肉样品。

7.根据权利要求3所述的高效液相色谱检测方法，其特征是：根据步骤(1)所述的标准曲线计算样品中各核苷的含量，以此量化地对供试样品进行龙眼果肉的质量评估。

8.一种根据权利要求1至7中任一权利要求所述高效液相色谱检测方法的用途，其特征是：在鉴别龙眼果肉真伪中的应用。