[发明专利]山药作为蛋白药物溶菌酶肠道吸收促进剂的应用

说明书

技术领域

本发明涉及中药山药作为肠道吸收促进剂的新用途，特别是山药作为蛋白药物溶菌酶的肠道吸收促进剂的制备方法。

背景技术

溶菌酶lysozyme，分子量约为14kDa，等电点10.7，英国细菌学家Fleming于1922年首先发现，是一种能水解致病菌中黏多糖的碱性酶。该酶广泛存在于鸟类和家禽的蛋清、哺乳动物的泪、唾液、血浆、尿、乳汁等体液中，微生物中也含此酶。其中以鸡蛋清含量最为丰富，是一种碱性蛋白质，对热稳定。

溶菌酶的功能：1)作为机体非特异免疫因子之一，参与机体多种免疫反应，补充了动物体内的非特异性免疫因子，它可改善和增强巨噬细胞吞噬消化功能，降低细胞抑制剂导致的白细胞减少，结合细菌脂多搪，减轻内毒素作用，从而增强机体免疫力。2)溶菌酶具有天然的抗菌消炎作用，它通过水解肽聚糖中N-乙酞胞壁酸和N-乙酞葡萄糖胺中的β-1，4糖苷键，在渗透压作用下导致革兰氏阳性菌细胞壁破裂，发生溶菌作用；在体内环境下，由于有分泌型免疫球蛋白A、补体参与，溶菌酶还能水解某些革兰氏阴性菌，如大肠杆菌等，从而杀死肠道内的腐败球菌，维持肠道内菌群正常化，促进双歧杆菌增殖，加强白清灭菌蛋白，Y-球蛋的防御因子，增强抗感染力。3)溶菌酶还可与带负电荷的病毒蛋白直接结合，与DNA、RNA、脱辅基蛋白形成复盐，使病毒失活，具有一定的抗病毒能力。而一般的抗菌剂对病毒却束手无策。4)溶菌酶还具有激活血小板的功能，可以改善组织局部血液循环障碍，分泌脓液，增强局部防卫功能，从而体现其止血、消肿等作用。不会造成药害残留和药物蓄积。

作为国家OTC化学药品，溶菌酶的口服含片及肠溶胶囊已广泛使用，并且复方溶菌酶滴眼液、复方溶菌酶胶囊和重组人溶菌酶喷雾剂等也已批准为临床研究的新药。但是，这些口服类溶菌酶药物多为直接在消化道中起抗菌消炎作用，无法穿越肠道屏障进入血液，因此不能有效提高血药浓度，导致体内吸收效率非常低，生物利用度很有限，不能充分发挥溶菌酶的药用价值。

提高血药浓度的最简便方法为静脉注射药物，已有多项发明专利和文献报导高水平溶菌酶血药浓度的优异药效，如静脉注射溶菌酶30000U/20g小鼠，治疗肺炎、肾炎、膀胱炎、咽喉炎等多种炎症的有效率可达100％。但注射方式给药不仅造成疼痛，特别是长期重复给药为病人带来精神和生理上的巨大压力，造成局部脂肪萎缩，皮肤色素沉着等，甚至可能发生如Arthurs反应等严重的药物过敏反应，产生的免疫复合物在局部血管基底膜沉积，导致病理损伤，以及全身免疫复合物病等(如血清病)。

近年来，非注射途径的给药方式受到了广泛的关注，其中口服给药方式无疑是最方便、最安全的途径之一。然而，口服的必经之路——胃肠道是大分子蛋白药物口服给药的最大天然屏障。大鼠离体空肠组织的吸收实验表明，作为一种蛋白类大分子药物，溶菌酶的生物利用度仅为1.47±0.20％，体内吸收效率则更低。为有效提高血药浓度，开发口服给药制剂，可以采用各种手段促进蛋白类大分子药物的肠道吸收，其中在药物中添加肠道吸收的促进剂是一种很好的策略。

发明内容

针对已有技术存在的不足，本发明的目的在于提供一种蛋白药物溶菌酶的肠道吸收促进剂的制备方法。

本发明的发明目的是通过如下技术方案实现的：

从中药理论出发，通过筛选数十种中药，对中药作为蛋白药物溶菌酶的肠道吸收促进剂进行了研究，实验发现山药能明显促进溶菌酶药物的肠道吸收，提高其药物的生物利用度。

通过筛选数十种中草药，挑选获得到了能有效促进溶菌酶的肠道吸收的中药-山药。《中国药典》以及《全国中草药汇编》记载，山药：甘；平；归脾、肺、肾经，具有补脾养胃，生津益肺，补肾涩精的作用，是一种常见的，也是常用的中药之一。

本发明促进剂的制备方法步骤如下：

取市售商品中药材山药，按常规方法煎制，然后按每100ml冷水浸泡120g山药的比例进行浸泡0分钟左右，快火煮沸后文火煎制20分钟左右，低速离心后取上清液，即获得山药水相萃取液部位即山药促进剂，4℃保存备用。

按溶菌酶用剂量为0.5mg-5.0mg，山药促进剂用量为0.2ml-2.0ml的比例使用对小鼠进行灌胃给药。实验证明山药确实能够作为大分子蛋白类药物肠道吸收的促进剂，大幅度促进溶菌酶的肠道吸收效率，提高溶菌酶的血药浓度。

实验结果还表明山药促进剂对小鼠溶菌酶血药本底基本没有影响，小鼠体况正常，同时能明显有效地促进蛋白药物溶菌酶的肠道吸收，是一种有效的肠道吸收促进剂。