[发明专利]苁黄补肾制剂质量标准的检测方法

说明书

技术领域

本发明属于中成药质量控制领域。

背景技术

苁黄补肾处方由肉苁蓉、熟地黄、菟丝子、五味子(酒蒸)四味药材组成，具有滋补肾阴、强筋壮骨的功效。此处方可制成丸、颗粒、片、硬胶囊等剂型。目前，公开的药品标准中只收载了丸剂标准(《国家药品监督管理局国家中成药标准汇编》内科肾系分册)，苁黄补肾其他剂型标准未见报道。丸剂标准中只有显微鉴别，肉苁蓉TLC鉴别和毛蕊花糖苷HPLC含量测定。此药处方由四味药组成，显然丸剂标准并不完善，不能有效保证产品的质量。

同时，我们在试验中还发现：涉及的颗粒、片以及硬胶囊这三种苁黄补肾新剂型在用丸剂标准中肉苁蓉鉴别项下供试液制备方法得到的供试液，其薄层色谱上的斑点与甜菜碱对照品色谱的斑点在位置上存在一定的差距。

另外，颗粒、片以及硬胶囊这三种苁黄补肾新剂型在做毛蕊花糖苷的HPLC含量测定时，阴性供试液有较大的干扰峰存在。试验不同的色谱柱和流动相组成均不能很好的把干扰峰与毛蕊花糖苷的峰分开。

发明内容

本发明目的是提供一种苁黄补肾制剂质量标准的检测方法，从而提高苁黄补肾新剂型质量可控性，保证产品质量的稳定。其中制剂是指颗粒、片和硬胶囊。

本发明对丸剂标准检测方法进行了较大的改进，具体为：增加了处方中熟地黄、菟丝子、五味子(酒蒸)的薄层定性鉴别，改变了肉苁蓉鉴别供试液的制备方法，更改了高效液相色谱含量测定成分为干扰小、含量高的松果菊苷。

之所以改为测定松果菊苷是因为用原丸剂标准中的含测方法检测苁黄补肾新剂型的毛蕊花糖苷含量时发现有比较大的干扰。试验了甲醇—乙腈-1％乙酸(13∶10∶77，11∶9∶80，15∶10∶75)、甲醇-0.1％甲酸(28∶72，35∶65)流动相，以及kromasil-C18(250mm×4.6mm，5μm)和Ultimate-C18(250mm×4.6mm，5μm)色谱柱，结果均不能使干扰峰与毛蕊花糖苷的峰分开。而检测松果菊苷时没有发现明显干扰峰。由于中药的复杂性，以及不能得到原丸剂标准申报厂家的丸剂样品进行比对研究，所以产生这种检测毛蕊花糖苷时存在比较大干扰问题的原因现在还不能确定，可能是所用的药材产地不同或者是制造工艺中的具体操作参数不同等原因造成的。

有文献报道，肉苁蓉中起改善性功能功效的主成分是苯乙醇苷类化合物。松果菊苷、毛蕊花糖苷都属于含量较高的苯乙醇苷类化合物。经过我们对市售5个不同产地肉苁蓉药材(其中2个为新疆产的管花肉苁蓉)的检测，发现4个产地松果菊苷的含量均大于毛蕊花糖苷含量，另一个产地的药材中两种成分的含量相当。所以改为检测干扰小、含量高的松果菊苷的含量也能较好的反映产品质量。

本发明所涉及的苁黄补肾新剂型的制法，除辅料品种和用量、制成总量、干燥工艺、最终剂型不同外，其它均按照丸剂标准中的处方和制法制造。整个制造方法与丸剂比较并没有大的、本质的改变。所以按照药品注册管理办法的分类，本发明所涉及的苁黄补肾颗粒、片或者是硬胶囊制剂应该属于8类新药(即仿制药改剂型)。

本发明提供了苁黄补肾制剂——颗粒、片、硬胶囊——质量标准的检测方法，包括用薄层色谱(TLC)对肉苁蓉、熟地黄、菟丝子、五味子(酒蒸)进行定性鉴别和用高效液相色谱(HPLC)测定肉苁蓉中活性成分——松果菊苷(echinacoside)的含量。

1、肉苁蓉的薄层鉴别

取苁黄补肾制剂(颗粒、片或者是硬胶囊)适量，研细，称取粉末0.5～1.0g，加水20ml，超声10min使溶散，离心(4500r/min)5min，取上清液再真空抽滤，滤液过强酸性阳离子交换树脂柱，用20ml水洗柱，再用0.5～4mol/l氨水溶液20～60ml洗脱，收集洗脱液，蒸干，用乙醇2ml溶解，静置，取上清液作为供试品溶液。另取缺肉苁蓉的阴性样品，同法制成阴性供试液。甜菜碱对照品加乙醇制成每1ml含5mg的对照品溶液。吸取供试品溶液和阴性供试液各10μl，对照品溶液5μl，分别点样于同一硅胶G薄层板上，以甲醇—冰醋酸—水(10～20∶0.5～2∶2～8)为展开剂，展开，取出，晾干，喷以改良碘化铋钾试液。供试品色谱中，在与对照品色谱相应的位置上，显相同颜色的斑点。阴性样品色谱无对应斑点。

2、熟地黄的薄层鉴别