[发明专利]一种HPCE指纹图谱鉴别葛根药材的方法

说明书

技术领域

本发明涉及中药材的鉴别方法，具体是采用HPCE法建立葛根(Pueraria lobata(Willd.)Ohwi)指纹图谱的鉴别方法。

背景技术

葛根是豆科植物野葛(Pueraria lobata(Willd.)Ohwi)的干燥根径，始载于我国汉代《神农本草经》，列为中品，是常用的传统中药，具解肌退热，生津，透疹，升阳止泻之功效，临床常用于外感发热头痛、项背强痛，口渴，消渴，麻疹不透，热痢，泄泻，以及高血压颈项强痛等症状。葛根在我国分布较广泛，资源很丰富。2005年以前，我国药典收载的葛根为豆科植物野葛Pueraria lobata(Wild.)Ohwi或甘葛藤Pueraria thomsonill Benth.的干燥根。2005年版中国药典开始将野葛和粉葛分开，并规定含量，野葛中葛根素含量不得少于2.4％；粉葛中葛根素的含量不得少于0.30％。药典中鉴定葛根的方法是外形观察和采用薄层色谱法定性检测药材中的葛根素，用高效液相色谱法检测药材中葛根素的含量。

中药色谱指纹图谱方法是近年来研究较多的一种中药鉴别和质量控制方法，该方法在实现物质群体整体控制方面具有明显的优势，并得到了国际社会的认可。英国草药典、印度草药典、德国药用植物学会、加拿大药用及芳香植物学会均接受并收集了指纹图谱的质控方法。用“中药色谱指纹图谱方法”鉴别中药的真伪，控制其质量更能客观地反映中药物质基础的整体观，是更为科学、有效的质控方法。

蔡光先等报道了5批不同地区的商品葛根30％乙醇超声提取物的HPLC指纹图谱，色谱条件是：色谱柱为大连依利特公司Hypersil BDS C18柱(4.6mm×200mm，5μm)；流动相A(乙腈)％B(水)％：0-7min，2-98％；7-60min，26-74％。柱温为25℃；流速为1.0mL·min-1；检测波长为250nm，得到的指纹图谱共有峰共11个。该方法用于鉴别葛根虽然具有供试品制备简单、精密度和重复性好等优点，但存在分析时间长、流动相有机溶剂用量比例大、出峰信息量少等不足(蔡光先，李顺祥，蒋炜.葛根超微饮片的HPLC指纹图谱研究，中南药学，2005：3(2)：67-70.)。

陈斌等等报道了10批不同地区的葛根30％乙醇热回流提取物的HPLC指纹图谱，色谱条件色谱柱为Agilent ZORBAX 80A Extend-C18分析柱(250mm×4.6mm，5μm)；流动相为75％水溶液与25％甲醇洗脱；流速1.0ml·min-1；柱温25℃；检测波长250nm；参比波长360nm；分析时间30min；供试品及参照物进样量各20μl，得到6个共有峰。该方法用于鉴别葛根虽然具有分析时间短、精密度和重复性好等优点，但存在流动相有机溶剂用量比例大、出峰信息量非常少等不足(陈斌，刘训红，蔡宝昌.葛根高效液相色谱指纹图谱的研究.时珍国医国药，2005，16(5)：384-385)。

陈士林等采用HPLC法研究报道了13批不同地区(10批为安徽霍山葛根基地产品)的葛根30％乙醇热回流提取物的指纹图谱，色谱条件：色谱柱为Zorbax XDB-C18(4.6mm×250mm，5μm)；流动相为甲醇-水，梯度洗脱：0-10min甲醇由25％升为30％，20-50min甲醇由30％升为80％，50-60min甲醇由80％升为100％；流速为0.5mL/min；检测波长为250nm；进样量为20μL，得到15个共有峰。该方法用于鉴别葛根虽然具有出峰信息量多、精密度和重复性好等优点，但存在流动相有机溶剂用量比例大、分析时间长等不足(陈士林，陈四保，杨大坚等.葛根高效液相指纹图谱的研究.中草药，2003，34(7)：661-663)。

发明内容

本发明的目的是提供一种鉴别葛根(Pueraria lobata(Willd.)Ohwi)药材的方法。

本发明实现上述目的的技术方案是：

一种HPCE指纹图谱鉴别葛根药材的方法，该方法由以下步骤组成：