[发明专利]黄珠子草中有效成分短叶苏木酚及8,9－单环氧短叶苏木酚的提取分离方法

说明书

技术领域

本发明涉及一种中药的提取、分离方法，具体涉及一种黄珠子草中有效成分短叶苏木酚及8，9-单环氧短叶苏木酚的提取分离方法。

背景技术

黄珠子草为大戟科叶下珠属植物黄珠子草(Phyllanthus SimplexRetz.)的全草，具有平肝、清热、利水、解毒之功效，用于治疗肠炎、肝炎、尿路感染、无名肿痛等。黄珠子草对乙肝病毒有很强的杀灭作用和保护肝损伤的作用，实验证明，黄珠子草中的短叶苏木酚和8，9-单环氧短叶苏木酚是它的主要活性成分。

由于短叶苏木酚和8，9-单环氧短叶苏木酚在植物体中含量较低，所以提取分离是富积有效成分，提高药材药效减少副作用的主要方法之一。提取分离过程中在尽可能的保留有效成分的前提下，简化提取分离步骤，减少成本，是由药材转换为药用原料的关键。

发明内容

本发明的目的是提供一种工艺简单，提取率高的黄珠子草中有效成分短叶苏木酚和8，9-单环氧短叶苏木酚的提取方法。

为达到上述目的，本发明采用的技术方案是：首先取黄珠子草药材粉碎成粗粉，然后加入粗粉重量的6～8倍的质量浓度为50～70％的乙醇回流提取2～3次，每次1～3小时，过滤，合并提取液，备用；将提取液减压回收乙醇至无醇味，再向其中加入回收后溶液体积3～4倍的蒸馏水形成混悬液，用石油醚在60～90℃下对混悬液提取至无色，去除石油醚后用乙酸乙酯提取，回收溶剂得到含黄珠子草的乙酸乙酯提取液；将黄珠子草的乙酸乙酯提取液减压回收溶剂，回收后的残渣加等量的甲醇在40～50℃下溶解，活性炭脱色，拌样，装入硅胶柱进行分离，用氯仿-甲醇(9∶1→1∶9)为洗脱剂梯度洗脱，采用TLC法检测洗脱液，每份洗脱液700mL，共收集200份洗脱液；合并第68～102份的洗脱液，减压回收溶剂至总量三分之一，在4℃静置24小时，滤过，滤液减压回收溶剂，在回收后的残渣中再加入等量的质量浓度为60～70％的乙醇溶解用聚酰胺柱分离，再用分别用质量浓度为10％→100％的乙醇对分离液进行梯度洗脱，采用TLC法检测洗脱液，每份洗脱液600mL，共收集110份洗脱液；合并第37～61份的洗脱液，滤过，回收乙醇，再进行硅胶柱分离，氯仿-甲醇(9∶1→1∶9)为洗脱剂梯度洗脱，甲醇重结晶，得淡黄色粉末短叶苏木酚；合并第72～95份的洗脱液，滤过，减压回收溶剂，在回收的残渣中加入等量的甲醇溶解，拌样，再进行硅胶柱分离，氯仿-甲醇(9∶1→1∶9)为洗脱剂梯度洗脱，用甲醇重结晶，得黄色粉末8，9-单环氧短叶苏木酚。

本发明采用乙醇提取，硅胶柱分离，利用短叶苏木酚和8，9-单环氧短叶苏木酚的极性不同进行分离，大大节约时间和能源。而且提取的短叶苏木酚和8，9-单环氧短叶苏木酚可作为制药生产的对照品或原料也可以用其单成分制药。

附图说明

图1是本发明提取的短叶苏木酚及8，9-单环氧短叶苏木酚的纯度检查图，其中1是短叶苏木酚，2是8，9-单环氧短叶苏木酚。

具体实施方式

实施例1，首先取黄珠子草药材粉碎成粗粉，然后加入粗粉重量的7倍的质量浓度为70％的乙醇回流提取2次，每次1小时，过滤，合并提取液，备用；将提取液减压回收乙醇至无醇味，再向其中加入回收后溶液体积3倍的蒸馏水形成混悬液，用石油醚在80℃下对混悬液提取至无色，去除石油醚后用乙酸乙酯提取，回收溶剂得到含黄珠子草的乙酸乙酯提取液；将黄珠子草的乙酸乙酯提取液减压回收溶剂，回收后的残渣加等量的甲醇在45℃下溶解，活性炭脱色，拌样，装入硅胶柱进行分离，用氯仿-甲醇(9∶1→1∶9)为洗脱剂梯度洗脱，采用TLC法检测洗脱液，每份洗脱液700mL，共收集200份洗脱液；合并第68～102份的洗脱液，减压回收溶剂至总量三分之一，在4℃静置24小时，滤过，滤液减压回收溶剂，在回收后的残渣中再加入等量的质量浓度为66％的乙醇溶解用聚酰胺柱分离，再用分别用质量浓度为10％→100％的乙醇对分离液进行梯度洗脱，采用TLC法检测洗脱液，每份洗脱液600mL，共收集110份洗脱液；合并第37～61份的洗脱液，滤过，回收乙醇，再进行硅胶柱分离，氯仿-甲醇(9∶1→1∶9)为洗脱剂梯度洗脱，甲醇重结晶，得淡黄色粉末短叶苏木酚；合并第72～95份的洗脱液，滤过，减压回收溶剂，在回收的残渣中加入等量的甲醇溶解，拌样，再进行硅胶柱分离，氯仿-甲醇(9∶1→1∶9)为洗脱剂梯度洗脱，用甲醇重结晶，得黄色粉末8，9-单环氧短叶苏木酚。