[发明专利]基于HPV-16的乳头瘤病毒疫苗

说明书

本发明涉及一种组合物在制备预防或治疗由除HPV-16之外的至 少一种乳头瘤病毒引起的感染或病理状态的药物中的用途，该组合物 包含人乳头瘤病毒(HPV)-16的一种或多种早期多肽或编码HPV-18的 一种或多种早期多肽的核酸。本发明对免疫疗法具有特殊兴趣，尤其 是在预防或治疗可能引起宫颈上皮内瘤形成(CIN)并最终引起宫颈癌 的HPV持续感染中。

乳头瘤病毒是已在很多高等生物，包括人类中鉴定到的小DNA病 毒(参见例如Pfister，1987，in The papovaviridae：The Papillomaviruses，Salzman and Howley edition，Plenum Press，New York，p1-38)。它们与良性到恶性肿瘤的病理状态有关。在良性肿瘤 中，病毒基因组是游离型的，而在恶性肿瘤中，HPV DNA被整合到宿 主染色体中(Stoler，2000，Int.J.Gynecol.Path.19，16-28)。

乳头瘤病毒具有大约7900个碱基对的双链环状DNA，该DNA被蛋 白衣壳围绕。该基因组包括含阅读框E1-E7的早期(E)区和晚期(L)区。 晚期区编码结构L1和L2蛋白，它们形成病毒衣壳，而早期基因编码 主要在细胞核中发现的调节蛋白。E1编码在病毒基因组维持和复制中 重要的两个蛋白。E2编码调节指导E6和E7转录的病毒启动子的活化 和阻遏蛋白(Bechtold et al.，2003，J.Virol.77，2021-2028)。 E4编码的蛋白结合和分裂胞质角蛋白网，且可能在病毒成熟中起作 用。E5蛋白的作用仍有争议，其在宿主染色体中病毒整合期间常常丧 失表达。癌症相关HPV基因型的E6和E7编码的基因产物参与受感染 细胞的致癌性转化(Kanda et al.，1988，J.Virol.62，610-613； Vousden et al.，1988，Oncogene Res.3，1-9；Bedell et al.，1987， J.Virol.61，3635-3640)，这大概是由于这些病毒蛋白分别结合细 胞肿瘤抑制基因产物p53和成视网膜细胞瘤(Rb)的能力。已经清楚地 确定了参与天然HPV-16E6多肽与p53结合的氨基酸残基是从残基118 至122(+1是第一个Met残基，或从优选使用的第二个Met残基开始， 从残基111至115)(Crook et al.，1991，Cell 67，547-556)，和参 与天然HPV-16E7多肽与Rb结合的那些残基位于残基21至26(Munger et al.，1989，EMBO J.8，4099-4105；Heck et 5 al.，1992，Proc. Natl.Acad.Sci.USA 89，4442-4446)。这种结合区在HPV-18的E6 和E7中也是保守的(Pirn et al.，1994，Oncogene 9，1869-1876； Heck et al.，1992，Proc.Natl.Acad.Sci.USA 89，4442-4446)。

目前，已经克隆了100个以上人乳头瘤病毒(HPV)基因型并进行了 测序(Stoler，2000，Int.J.Gynecol.Path 19，16-28)。只有40 个HPV基因型感染生殖器粘膜，其中大约15个使女性处于生殖道恶性 肿瘤的风险中。更具体地说，在70％以上的侵入性宫颈癌中检测到两 个最流行的基因型-HPV-16和HPV-18，而HPV-31、HPV-33和HPV-45 加起来占到这种情况的10％(Cohen et al.，2005，Science 308， 618-621)。