[发明专利]HLA-A*3303限制性WT1肽和包含此肽的药物组合物

说明书

技术领域

本发明涉及HLA-A^*3303限制性肽，具体地说所述肽包含由来自 WT1蛋白的9个连续的氨基酸组成的氨基酸序列，其中在氨基酸序列 中第2位的氨基酸选自Ala、Ile、Leu、Val、Phe、Tyr、Ser和Asp， 并且在氨基酸序列中第9位的氨基酸是Arg。此外，本发明还涉及编 码此肽的多核苷酸和包含此肽的用于治疗或预防癌症的药物组合物 等等。

发明背景

WT1基因(Wilms肿瘤1基因(Wilms′tumor 1 gene))被认为是导致 Wilms肿瘤即儿童肾癌的基因(非专利文献1和2)。WT1是具有锌指 结构的转录因子。WT1基因起初被认为是肿瘤阻抑基因。然而随后的 研究(非专利文献3、4、5和6)表明WT1基因在造血肿瘤和实体癌中 起癌基因的作用。

WT1基因在许多类型的恶性肿瘤中高水平表达。对作为自体蛋白 的未突变WT1基因产物在活体中是否具有免疫原性已做了验证。这 些结果表明了在肿瘤细胞中高水平表达的WT1基因所表达的蛋白经 过在细胞内的加工而被片段化。产生的肽和MHC I类分子形成复合 体，该复合体被呈递到细胞表面，通过肽的接种可以诱导识别该复合 体的CTL(非专利文献7、8和9)。同样表明用WT1肽或WT1的cDNA 免疫小鼠，被移植的表达WT1基因的肿瘤细胞被高几率地排斥(非专 利文献7和10)；而生理性地表达WT1基因的正常组织没有受到被诱 导的CTL的破坏(非专利文献7)。体外人类细胞的实验表明：当具有 结合HLA-A^*0201分子(人类MHC I类分子之一)的高能力的Db126肽 或WH187肽(SEQ ID No：1的第187-195位的氨基酸，SLGEQQYSV) 用于刺激具有HLA-A^*0201的人类外周血单核细胞时，WT1-特异性 CTL被诱导。被诱导的CTL具有对高水平地内源表达WT1基因的肿 瘤细胞特异的细胞毒活性，该CTL的细胞毒活性是HLA-A2限制性 的(非专利文献11)。人类细胞的体外实验表明：使用匹配 HLA-A^*2402(其是HLA-A等位基因之中最频繁地出现在日本人中的) 的WT1肽(WT1₂₃₅；SEQ ID No：1的第235-243位的氨基酸， CMTWNQMNL)，可以诱导WT1特异性CTL(TAK-1)(非专利文献 12)。被诱导的CTL并不阻抑部分地生理表达WT1基因的正常造血干 细胞形成集落的活性。这些报道强烈地表明WT1特异性CTL不止可 以在小鼠中诱导而且可以在人类中诱导。此CTL具有抗高水平表达 WT1基因的肿瘤细胞的细胞毒活性，但不具有抗生理地表达WT1基 因的正常细胞的细胞毒活性。(非专利文献7、10、11、12、13和14)。