[发明专利]海洋低温纤维素酶与产酶方法及其产生菌交替假单胞菌

说明书

技术领域

本发明涉及一种微生物，特别是一种分离自连云港海域的交替假单胞菌Z6(Pseudoalteromonas sp.Z6)CGMCC NO.2155(已于2007年9月26日保藏在中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心CGMCC，保藏编号为CGMCC NO.2155)；本发明还涉及该菌株产低温纤维素酶的方法及其产品。

背景技术

纤维素酶(EC 3.2.1)是一类可广泛应用于医药、食品、棉纺、环保及可再生资源利用等领域的酶制剂。普通纤维素酶的最适作用温度多为45～65℃。低温纤维素酶最适作用温度可低至20℃。由于反应温度较低，不但在低温条件下可以高效反应，而且在生产工艺中可以通过较低温度的热处理使酶失活，节约能量与费用，成为人们研究开发的热点。

在过去的半个多世纪里，人们主要从寒带和冰川等不同环境的陆地开发和获得低温纤维素酶。但是，随着研究的不断深入，从陆地生物开发低温纤维素酶的机会大大减小，满足不了人们的需要。因此，科学工作者们将眼光投向占地球表面积3/4的资源丰富的海洋。海洋环境十分独特，并包罗了低温环境，分布着数量极其庞大、种类繁多的低温微生物，有利于获得新的低温纤维素酶及其产生菌。新型海洋低温酶研究不但为生物起源及进化、微生物的分类、酶催化机制等基础研究提供新的依据，而且推动酶在工业中的广泛应用。

目前，已报道的交替假单胞菌产生的适冷纤维素酶的最适温度分别为40℃和35℃。其它筛选获得的海洋嗜冷菌所产低温纤维素酶最适温度为40℃。菌株Z6所产纤维素酶最适作用温度更低，在常温下催化活性高，更适于工业生产。

发明内容

本发明所要解决的技术问题是针对现有技术的不足，提供一种新的能产低温纤维素酶的交替假单胞菌。

本发明所要解决的另一个技术问题是研究交替假单胞菌菌株的生长特性，及其产低温纤维素酶的方法及产品。

本发明所要解决的技术问题是通过以下的技术方案来实现的。

本发明的特征包括交替假单胞菌Z6(Pseudoalteromonas sp.Z6)菌株本身，以及利用该菌株产低温纤维素酶的方法，以及利用该菌株所产的低温纤维素酶产品。

本发明所涉及的菌株是在中国黄海连云港海域的海水中分离到的交替假单胞菌Z6(Pseudoalteromonas sp.Z6)，该交替假单胞菌Z6于2007年9月26日保藏在中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心CGMCC，保藏编号为CGMCC NO.2155。

一、本发明菌株的形态特征与生理生化特征

1.1形态特征：

菌株为革兰氏阴性杆状细菌、有荚膜、无芽孢，大小约为1～1.8μm×0.5～0.8μm(图1、图2)。菌株在纤维素固体培养基25℃培养2d后，菌落直径3 mm-4mm，圆形白色、湿润、边缘光滑、中间隆起、半透明、易挑取，能产生明显的纤维素透明圈(图3)。

1.2菌株的生理生化特征

菌株Z6的生理生化特征见表1，菌株Z6能水解淀粉，不产生硫化氢，液化明胶，不产生色素，不能利用柠檬酸盐，吲哚试验、触酶试验和V-P试验阳性，MR试验阴性，能利用乳糖、麦芽糖、果糖、半乳糖、甘露糖、鼠李糖、糖原、木糖和淀粉为碳源，不能利用蔗糖、纤维二糖、D-葡萄糖、甘油和乙酸钠，能利用硫酸铵和酪氨酸、丙氨酸、甘氨酸、丙酮酸钠、甲硫氨酸。通过Bergey’s Manual of Systematic Bacteriology(second edition)分析比较，初步判定该菌株为Pseudoalteromonas属。

表1  菌株Z6的生理生化特征