[发明专利]海藻酸－碳酸钙杂化凝胶固定β－葡萄糖醛酸苷酶的方法

权利要求书

1.一种海藻酸-碳酸钙杂化凝胶固定β-葡萄糖醛酸苷酶的方法，其特征在于包括以下步骤：

(1)等体积等浓度的碳酸钠溶液和氯化钙溶液室温下混合搅拌，静置，碳酸钙粉末沉淀依次用水和丙酮洗涤，空气中自然干燥，得到微米级中孔碳酸钙颗粒；

(2)在β-葡萄糖醛酸苷酶的三羟甲基氨基甲烷-盐酸(Tirs-HCl)缓冲液中或起水溶液中加入碳酸钙颗粒，室温下吸附，离心分离，得到吸附葡萄糖醛酸苷酶的碳酸钙颗粒；

(3)海藻酸钠溶液与制得的吸附葡萄糖醛酸苷酶的碳酸钙颗粒混合均匀，再滴加到氯化钙溶液中，老化。

2.一种海藻酸-碳酸钙杂化凝胶固定β-葡萄糖醛酸苷酶的方法，其特征在于包括以下步骤：

(1)将100ml 0.33M的碳酸钠溶液迅速倒入等体积等浓度的氯化钙溶液，室温下高速搅拌30s，然后停止搅拌，静置15分钟，将所得的碳酸钙粉末离心，依次用去离子水和丙酮洗涤，空气中自然干燥，得到微米级中孔碳酸钙颗粒；

(2)将β-葡萄糖醛酸苷酶溶于浓度为0.05mol/L的三羟甲基氨基甲烷-盐酸缓冲液中或去离子水中，配制成浓度为0.5mg/mL的β-葡萄糖醛酸苷酶溶液，然后将15mg碳酸钙颗粒与1mlβ-葡萄糖醛酸苷酶溶液混合，室温下吸附2h，离心分离得到吸附葡萄糖醛酸苷酶的碳酸钙颗粒；

(3)将海藻酸钠溶于去离子水制成2.0％的溶液，取5ml与按照步骤(2)制得的吸附葡萄糖醛酸苷酶的碳酸钙颗粒混合均匀，用注射器滴加到0.2M的氯化钙溶液中，老化30min。

3.权利要求1或2所述的方法得到海藻酸-碳酸钙杂化凝胶固定β-葡萄糖醛酸苷酶的颗粒。