[发明专利]一种从石蒜属植物中提取活性生物碱的方法

说明书

技术领域

本发明属于天然有机化学领域，涉及一种从石蒜属植物中提取活性生物碱的方法。

背景技术

石蒜属(Lycoris Herb.)植物是石蒜科(Amaryllidaceae)中的一个重要属，为多年生草本植物。据不完全统计，其在全世界约有20多种，主要分布于东亚的暖温带至亚热带。石蒜中含有大量生物碱。国外科学家在20世纪初就提取分离出大量生物碱。如Lycorine(石蒜碱)，tazettine(多花水仙碱)，homolycorine(高石蒜碱)，加可拉敏(lycoramine)，石蒜伦碱(lycorenine)，伪石蒜碱(pseudlycorine)，去甲普鲁维因(norpluviine)，表加兰加敏(epigalanthamine)，维他廷(vittatine)，普鲁维因(pluviine)，小星蒜碱(hippeastrine)等生物碱。

我国科技相对落后，到了20世纪50年代才开展石蒜生物碱的研究，也取得了一定成果。如洪山海、马广恩等对我国石蒜也进行了植物化学及药理方面的研究，并从中分离出新的化合物紫花石蒜碱(squamigerine)。

现代药理研究和临床表明，石蒜生物碱具有多种生物活性和疗效：加兰他敏是治疗老年期痴呆症、小儿麻痹后遗症及重症肌无力的特效药，对痴呆患者和脑器质性病变引起的记忆障碍亦有改善作用；石蒜碱具有抗阿米巴原虫、抗癌、降压、催吐、祛痰、解痉，比吗啡强5倍的镇痛作用、比阿司匹林也有更强的镇痛作用。其衍生物石蒜碱内铵盐用于治疗消化道癌、肝癌、卵巢癌、肺癌、头颈部癌、恶性淋巴瘤等，其中对胃癌、卵巢癌疗效较好；力可拉敏用于脊髓灰质炎后遗症性瘫痪，脑血管意外所致的偏瘫，坐骨神经炎；多花水仙碱具有拟胆碱样作用，对吉田肉瘤的生长具有很好抑制作用。

目前，现有技术中以石蒜为原料，经过烦琐的提取分离纯化步骤，只生产一种石蒜生物碱单体产品而废弃富含其它宝贵活性成分的生物碱，没有充分利用石蒜资源，并且生产周期长、产率收率不高、产品远没有达到药用级的高纯度要求。中国专利文献“一种石蒜氢溴酸加兰他敏酸水浸提生物碱提取方法及工艺”(公开号CN1569856，公开日为2005.01.26)中大量使用酸提取，生产过程中使用大量酸碱，排放大量废酸废碱，严重污染环境，不利于产业化；“从石蒜粗提物中分离高纯度加兰他敏的方法”(公开号CN1490319，公开日为2004.04.21)中的工艺中大量使用有机溶剂，生产安全系数低，成本高，工业化生产受到限制；中国专利文献“从石蒜或雪花莲属原料中提取加兰他敏的方法”(公开号CN1696131，公开日为2005.11.16)中所用仪器价格昂贵、处理量小、需要高级技术人员才能操作，不适宜放大生产，产业化受到限制；并且大多数工艺都只得到单一产品，造成资源浪费。如“从石蒜粗提物中分离高纯度加兰他敏的方法”、“从石蒜粗提物中分离高纯度加兰他敏的方法”、“一种石蒜氢溴酸加兰他敏树脂吸附除杂方法及工艺”和“从石蒜属植物中提取力可拉敏的工艺方法”等专利文献。

总之，现有以石蒜为原料生产生物碱的方法存在以下不足：产品单一、步骤烦琐、周期长、产品收得率不高、安全系数低、成本高、石蒜资源利用率不高和环境污染严重，以及不易产业化。

发明内容

本发明的目的在于提供一种从石蒜属植物中提取活性生物碱的方法，该方法产品收得率高，可以同时得到多种产品，并且环境污染低。

本发明提供的从石蒜属植物中提取活性生物碱的方法，其步骤包括：

(1)在切碎后的石蒜属植物中加入体积为2～10倍量的水，再加入复合纤维素酶，复合纤维素酶与石蒜属植物的质量百分比为0.1～0.5％，调节pH值至5～8，在温度20～60℃下酶解2～24小时，再将酶解后石蒜属植物细胞破碎，过滤，得到提取液；

(2)浓缩上述提取液，得到提取物浓缩液，该浓缩液的比重在20℃测量时为1.05～1.15；

(3)按pH值分步对上述提取物浓缩液进行萃取；

(4)将萃取各步得到的产物以粗产品比填料为1∶60～1∶5的量分别进行柱层析，再进行洗脱；

(5)将柱层析分离得到的相同组分合并，反复重结晶，得到多种高纯度单体。

本发明方法对上述技术方案进行了下述优化，

步骤(1)中复合纤维素酶的组分及质量比为：纤维素酶40-50％，果胶酶30-40％、半纤维素酶20-30％。

步骤(3)按下述过程进行萃取：