[发明专利]一种治疗胆囊疾病的中药组合物及其指纹图谱分析方法

权利要求书

1.一种治疗胆囊疾病的中药组合物的指纹图谱分析方法，其特征在于针对中药组合物中的8种主要成分，采用高效液相色谱法获取主要成分的指纹图谱，具体步骤如下：

(1)供试品的制备：方法1：取该中药组合物片剂，除去包衣，在70℃下干燥，研成细粉，准确称取100mg，置10ml容量瓶中，加入70％甲醇8ml，超声提取40分钟，放冷至室温后用70％甲醇定容，混匀后过0.45μm微孔滤膜，取续滤液20μl，注入高效液相色谱仪中测定；方法2：取该中药组合物片剂，除去包衣，在70℃下干燥，研成细粉，准确称取250mg，置具塞锥形瓶中，准确加入70％甲醇25ml，称重，回流提取1小时，放冷至室温后用70％甲醇补足重量，混匀后以0.45μm微孔滤膜滤过，取续滤液20μl，注入高效液相色谱仪中测定；

(2)液相色谱分析，所使用色谱柱型号为Dimonsil C₁₈色谱柱或ZORBAX SB-C₁₈色谱柱；流动相由水相和有机相组成，水相为含0.1％甲酸的水溶液，用三乙胺调至pH为5，有机相为乙腈；洗脱梯度程序为：有机相比例在40分钟从15％线性增加至35％，从第40分钟至50分钟，有机相所占比例由35％线性增加至50％，再从第50分钟至60分钟，有机相所占比例由50％线性增加至100％，并保持100％比例至70分钟；检测器使用紫外检测器；检测波长为346mm；

其中，供测药物的原料为大黄、虎杖、山楂、郁金、陈皮、青皮、白茅根制成的中药片剂；

针对中药中的主要成分所得的高效液相色谱指纹图谱，其中含有8种主要化合物，分别为金丝桃甙，橙皮苷，白藜芦醇，川陈皮素，姜黄素、大黄素、大黄酚和大黄素甲醚。

2.根据权利要求1所述的指纹图谱分析方法，其特征在于所述组合物的主要成分在得到的指纹图谱中存在20个共有峰，其中，9、11、12、18、19、20号峰为大黄药材特征峰，6、7、14、16、17号峰为陈皮药材特征峰，3、10、11、13、15、18、20号峰为虎杖药材特征峰，2号峰为白茅根药材特征峰，16号峰为郁金药材特征峰，6、7、14、15、17号峰为青皮药材特征峰，1、4、5号峰为山楂药材特征峰；其中5号峰为金丝桃苷、7号峰为橙皮苷、10号峰为白藜芦醇、15号峰为川陈皮素、16号峰为姜黄素、18号峰为大黄素、19号峰为大黄酚、20号峰为大黄素6-甲醚的吸收峰。

3.根据权利要求2所述的指纹图谱分析方法，其特征在于：主要成分在指纹图谱中存在着20个共有峰，以其中的大黄素所对应色谱峰为参照峰，以该峰的保留时间和峰面积值为基准，其它共有峰的相对保留时间和相对峰面积具有如下两种情形之一种：

第一种：

第二种：

这些共有峰的峰面积和保留时间相对值代表了该中药组合物特定的配比和工艺。