[发明专利]促进人皮下脂肪干细胞分化成熟的方法及其应用

说明书

技术领域

本发明涉及干细胞及基因工程技术领域，具体涉及一种利用重组人成纤维细胞生长因子10(FGF10)表达载体作用于人皮下脂肪干细胞，使其分化成熟的方法，及其在皮肤创伤治疗和整形美容中的应用。

背景技术

人胚胎干细胞(human embryonic stem cells，hES)是从着床前的内细胞团(inner cell mass，ICM)获得的具有多向分化潜能性，可以发育成为各种细胞的一类细胞系。因其具有多潜能性，而成为组织工程、器官移植等各项研究的重要材料来源。然而胚胎干细胞的研究和应用存在伦理问题，所以近年来对于成体干细胞的研究日益受到关注，其中脂肪组织因为来源丰富，提取方便，所以从中提取干细胞逐渐被研究者所重视。该研究大都集中于脂肪含量较多的动物，尤其对兔皮下脂肪的分离培养及诱导鉴定做了大量卓有成效的工作。近来由于吸脂手术越来越多，很多人开始从废弃的脂肪中进行提取人脂肪干细胞的研究。Patricia A.Zuk等人2002年在抽脂术组织中成功分离培养脂肪干细胞，并诱导分化成脂肪细胞、软骨细胞、成骨细胞、神经细胞等三个胚层来源的细胞(Patricia A.Zuk，et al.Human adipose tissue is a source of multipotentstem cells.Mol bio of the cell，2002；13：4279～95)，最近更有人将其定向诱导成为心肌细胞(Lenka，et al.Obesity Research，2003)。所以可以将之称为抽脂术细胞(processed lipoaspirate，PLAs)或脂肪来源的间充质干细胞(adipose derived stem cells，ADSCs)。然而吸脂术对皮下脂肪有加热液化的操作过程，对细胞的存活和培养带来不利。

人成纤维细胞生长因子(FGFs)是由数量众多的成员组成的一个超家族，目前被鉴定的FGFs已有23种，其中FGF10是四肢、肺、牙齿、下颌腺以及白色脂肪组织等器官组织形成中重要的信号调节分子。基因敲除(gene knockout，KO)技术是研究该基因功能的主要手段，近年通过制备FGF10的KO小鼠，发现FGF10广泛参与胚胎器官组织的形成发生。在人的成体组织中，FGF10是表达于白色脂肪组织的唯一的FGF，而在白色脂肪组织中只有ADSC能在一定条件下分泌FGF10(Itoh N，et al.FGFs as multifunctional signaling molecules：divesity of structure andfunction.Seikagaku，2001；73(7)：525～35)，并且FGF10在体内发挥作用时间短暂，半衰期仅为10小时左右(A.A.Thomson，et al.Prostatic growthand development are regulated by FGF10.Development，1999；126：3693～701)。

脂肪组织的生长不仅包括脂肪细胞体积的增大，也包含了新脂肪细胞的生成，而新脂肪细胞即为白色脂肪组织中的脂肪干细胞分化而来。调控这一分化过程的转录调节因子和细胞因子有很多，主要有CAAT增强子结合蛋白家族(C/EBPs)中的C/EBPα、C/EBPβ和过氧化物酶体增殖物激活受体家族(PPARs)中的PPARγ等。这些转录调节因子共同控制着脂肪细胞的分化，其中尤以C/EBPs和PPARs的协同作用最为重要，两者能相互激活转录，而在转录过程中这些因子作用也有先后顺序，C/EBPβ在分化过程中首先得以表达，随即能激活C/EBPα和PPARγ的表达，而C/EBPα也能诱导PPARγ的表达(Evan D.Rosen，et al.Transcriptional regulation of adipogenesis.Gene & Development，2000；14：1293～307)。

干细胞在体内不同部位分化为不同组织细胞，组织微环境在调控分化方向上起了重要的作用，为多种临床医疗拓展了新的途径和思路。

发明内容

本发明的目的在于提供一种促进人皮下脂肪干细胞分化成熟的方法，及其在皮肤创伤治疗和整形美容中的应用。