[发明专利]N－甲基－D－天冬氨酸受体在癫痫发生中的作用

说明书

技术领域

本发明属于生物技术和医药领域，具体涉及N-甲基-D-天冬氨酸受体NR2A亚单位及其拮抗剂、抑制剂或阻断剂的用途。

背景技术

癫痫病是大脑神经元突发性异常放电，导致短暂的大脑功能障碍的一种慢性疾病。由于异常放电神经元所涉及的部位不同，可表现为发作的运动、感觉、植物神经、意识及精神障碍。癫痫病(Epilepsy)是一种危及人类健康的常见疾病，目前本领域中对于癫痫病的治疗还缺乏有效手段。

N-甲基-D-天冬氨酸受体(N-Methyl-D-Aspartate(NMDA)Receptor，简称NMDA受体)是哺乳动物神经系统中一种重要的兴奋性谷氨酸受体，参与体内许多生理和病理过程，NMDA受体过度激活引起的谷氨酸兴奋性毒性是导致某些神经系统疾病的病因。所以，NMDA受体是目前治疗人类某些神经系统疾病药物研发的重要靶点之一。

目前已知，NMDA受体在癫痫病的产生过程中起一定的作用；而脑源性神经营养因子(BDNF)是癫痫病产生过程中的另一因素，癫痫病患者中，BDNF表达升高且可激活其受体酪氨酸蛋白激酶受体B(TrkB)；脑室给予TrkB-Fc已结合内源性的BDNF能延缓电刺激点燃癫痫动物模型(kindling model)中癫痫病生成；TrkB基因剔除小鼠在点燃癫痫动物模型中不能被诱发出癫痫病。这些研究证明，NMDA受体的激活以及下游BDNF的表达对颞叶癫痫病的形成有作用。

然而，由于NMDA受体本身由多个亚单位组成，且不同的NMDA受体的亚单位参与NMDA受体相关的不同作用机制，例如，有些NMDA受体的亚单位可能和神经元的发育、突触可塑性、学习和记忆等生理过程相关，而有些NMDA受体的亚单位可能和疾病发生和发展相关。尽管目前已知NMDA受体过度激活是某些神经系统疾病如癫痫的病因，然而本领域人员仍然无法得知NMDA受体的哪些亚单位是真正致病相关的。因此，有必要进一步研究NMDA受体的各亚单位的作用机制，以找到更具有针对性的药物靶点。

发明内容

本发明的目的在于提供一种筛选抗癫痫的潜在物质的方法。

本发明的另一目的在于提供一种NMDA受体NR2A亚单位或其拮抗剂、抑制剂或阻断剂的用途。

本发明的另一目的在于提供一种NMDA受体NR2B亚单位或其拮抗剂、抑制剂或阻断剂的用途。

在本发明的第一方面，提供一种筛选抗癫痫的潜在物质的方法，包括以下步骤：

(a)将候选物质与表达NMDA受体NR2A亚单位的体系接触；和

(b)检测候选物质对NMDA受体NR2A亚单位的影响；

其中，若所述候选物质可抑制NMDA受体NR2A亚单位的表达或活性，则表明该候选物质是抗癫痫的潜在物质。

在本发明的一个优选例中，所述体系选自：溶液体系、细胞体系、组织体系、或器官体系。

在本发明的另一优选例中，所述的体系可以是动物体系。更优选的，所述的动物体系为癫痫动物模型。例如：所述的动物体系选自(但不限于)：点燃癫痫动物模型，或匹罗卡品癫痫动物模型。

在本发明的另一优选例中，所述的细胞体系选自(但不限于)：海马细胞、或HEK293细胞。

在本发明的另一优选例中，步骤(a)包括：

在测试组中，在包含NMDA受体NR2A亚单位的细胞体系中添加候选物质；和

在步骤(b)中，检测NMDA受体NR2A亚单位的表达或活性，并与对照组比较，其中所述的对照组是不添加所述候选物质的、包含NMDA受体NR2A亚单位的细胞体系。

在本发明的另一优选例中，如果测试组中NMDA受体NR2A亚单位的表达或活性在统计学上低于(优选显著低于，如低15％；更优选的，低30％)对照组，就表明该候选物质是抗癫痫的潜在物质。

在本发明的另一优选例中，所述的细胞体系中还包括脑源性神经营养因子BDNF；且所述步骤还包括：检测测试组中的BDNF(或BDNF mRNA)的水平，并与对照组中的BDNF的水平相比较，如果测试组中BDNF(或BDNF mRNA)的水平在统计学上低于(优选显著低于，如低15％；更优选的，低30％)对照组，就表明该候选物质是抗癫痫的潜在物质。

在本发明的另一优选例中，步骤(a)包括：在测试组中，给予包含NMDA受体NR2A亚单位的癫痫动物模型候选物质；和

步骤(b)包括：检测该动物模型的癫痫发生或发展情况，并且与对照组比较，其中所述的对照组是不给予所述候选物质的、包含NMDA受体NR2A亚单位的癫痫动物模型。