[发明专利]虎颜花的组织培养繁殖方法

权利要求书

1.虎颜花的组织培养繁殖方法，其特征包括以下的步骤：

(1)外植体诱导材料消毒和不定芽诱导：在生长季节选取生长旺盛虎颜花(Tigridiopalma magnifica C.Chen)的幼嫩叶片为外植体，冲洗干净后先用70％～75％的酒精浸泡10～30s，再用0.05％～0.2％升汞溶液或1％～2％的次氯酸钠溶液消毒5～10min，无菌水冲洗后切成小块，接种到培养基中，在温度(28±2)℃，光照度1500～2000lx，光照8～12h/天，培养形成不定芽，所述的培养基每升中含有6-苄基嘌呤5.0～10.0mg，萘乙酸0.5～1.0mg，蔗糖20～30g和琼脂5～7g，其余为MS，pH5.5～5.8；

(2)不定芽继代增殖：将步骤(1)诱导出的不定芽切割后再继代培养于与步骤(1)相同的培养基中，在温度(28±2)℃，光照度1500～2000lx，光照8～12h/天，进行不定芽的增殖；

(3)生根培养：当步骤(2)的芽高约2～3cm时，切下接种到生根培养基中，在温度(28±2)℃，光照度1500～2000lx，光照8～12h/天，培养至正常生根，所述的培养基每升中含有萘乙酸0.5～1.0mg，0.5～1g活性炭，蔗糖20～30g和琼脂5～7g，其余为1/2MS，pH5.5～5.8，所述的1/2MS是将MS中的大量元素减半，其它成分不变而组成的培养基；

(4)试管苗移栽：当步骤(3)的试管苗长至3～4cm时，在自然光照下炼苗7～10天，洗掉根部培养基，移栽到由沙、珍珠岩、泥炭土等量混合的基质中，喷雾保湿85％～95％、遮荫75％～85％、保温20～30℃培养。

2.根据权利要求1的虎颜花的组织培养繁殖方法，其特征是步骤(1)中所述的无菌水冲洗次数为4～5次，先培养5～10天后再转入同前的新鲜培养基中，继续培养45～50天在外植体上形成不定芽；步骤(2)一个继代增殖周期为30～40天，步骤(3)所述的培养时间是30天；步骤(4)所述的移栽时间为30～40天后上盆栽培。