[发明专利]双荧光报道基因构建物和测量翻译再编码的测定

权利要求书

1.翻译再编码报告基因构建物，其包括：

a)第一荧光蛋白编码序列；

b)编码不同于第一荧光蛋白的荧光蛋白的第二荧光蛋白编码序列； 和

c)介于第一荧光蛋白编码序列和第二荧光蛋白编码序列间的接头 序列；和

d)介于第一荧光蛋白编码序列和第二荧光蛋白编码序列间的再编 码信号序列，

其中第一荧光蛋白编码序列和第二荧光蛋白编码序列是相互在框 外的但在再编码时共表达为单条融合多肽，并且其中接头序列编码能 物理隔离共表达的荧光蛋白的多肽，产生来源于每种蛋白的增加的荧 光输出。

2.根据权利要求1的翻译再编码报告基因构建物，其中接头编码的多 肽降低了共表达的荧光蛋白间的荧光共振能量转移(FRET)。

3.根据权利要求1或2的翻译再编码报告基因构建物，其中接头编码 包含基序A(EAAAK)_nA的多肽，其中n是位于1和10间的整数。

4.根据权利要求3的翻译再编码报告基因构建物，其中n＝2。

5.根据权利要求1的翻译再编码报告基因构建物，其中接头编码SEQ  ID NO：1的序列。

6.根据权利要求1的翻译再编码报告基因构建物，其中接头包括额外 的核苷酸来促进克隆。

7.根据权利要求1的翻译再编码报告基因构建物，其中接头由SEQ ID  NO：2的序列组成。

8.根据权利要求1的翻译再编码报告基因构建物，其中荧光蛋白是红 色荧光蛋白和绿色荧光蛋白。

9.根据权利要求8的翻译再编码报告基因构建物，其中红色荧光蛋白 编码序列位于绿色荧光蛋白编码序列的下游。

10.根据权利要求1的翻译再编码报告基因构建物，其中再编码信号 序列介于第一荧光蛋白编码序列和接头序列间。

11.根据权利要求10的翻译再编码报告基因构建物，其中再编码信号 序列是移码信号序列。

12.根据权利要求11的翻译再编码报告基因构建物，其中移码信号序 列是-1移码信号序列。

13.根据权利要求12的翻译再编码报告基因构建物，其中-1移码信号 序列是HIV-1gag/pol移码信号序列。

14.根据权利要求11到13任一项的翻译再编码报告基因构建物，其 中移码信号序列由SEQ ID NO：4的序列组成。

15.包含权利要求1到14任一项的翻译再编码报告基因构建物的载体。

16.包含权利要求1到14任一项的翻译再编码报告基因构建物的宿主 细胞。

17.包含权利要求15的载体的宿主细胞。

18.根据权利要求16的宿主细胞，其用所述构建物稳定转化。

19.根据权利要求17的宿主细胞，其用所述载体稳定转染。