[发明专利]削弱HIV－1增殖的方法和组合物

说明书

发明背景

本发明总的涉及用于抑制有症状或无症状的慢性感染患者中的人免疫缺陷病毒-1(HIV-1)增殖、从而尽可能减少发展成AIDS的组合物和方法。

目前采用了或正在研究多种治疗人免疫缺陷病毒(HIV-1)患者的治疗方法。某些治疗HIV-1的方法关注于HIV-1的反式激活基因(tat)，该基因产生病毒高水平转录必需的蛋白质(Tat)。已测定了tat基因及其蛋白质的序列，并检测了它们在HIV的建议治疗中的作用(例如可参见美国专利6,525,179)。Tat蛋白在细胞外释放，使它可被其它感染细胞摄取，以增强这些细胞中HIV-1的转录，它也可被未感染的细胞摄取，从而改变宿主细胞的基因激活作用并使细胞易于被病毒感染。细胞对Tat的摄取非常强烈，已报道这种摄取由该蛋白质的一条短的碱性序列介导(S.Fawell等，1994 Proc.Natl.Acad.Sci.USA，91：664-668)。

已经在动物中制得了Tat蛋白的单克隆和多克隆抗体，这两种抗体显示能在体外阻断Tat蛋白的摄入，将Tat蛋白的这种单克隆或多克隆抗体加入组织培养介质能在体外减弱HIV-1感染(例如可参见美国专利6,524,582中提到的文献)。

本发明共同发明人之一先前发表的科学论著和专利(例如，G.Goldstein，1996Nature Med.2：960；G.Goldstein，2000 Vaccine，18：2789；1995年11月30日公布的国际专利申请WO 95/31999；1999年1月21日公布的国际专利申请WO 99/02185；2002年11月8日公布的国际专利申请WO 01/82944；美国专利5,891,994；6,193,981；6,399,067；6,524,582；和6,525,179；公布的美国专利申请US 2003/0,166,832和US2003/0,180,326)指出，HIV-1 Tat蛋白上某些表位的抗体可作为AIDS疫苗和治疗剂。

例如，这些公布涉及与跨越下述Tat氨基酸残基4-12的“HIV-1 Tat表位1”序列内的表位特异性结合的抗体：Val-Asp-Pro-X₇-Leu-Y₉-Pro-Trp-Z₁₂-(SEQ ID NO：1)，其中，X₇是Arg、Lys、Ser或Asn，Y₉是Glu或Asp，Z₁₂是Lys或Asn，以及由该抗体和HIV-1 Tat的其它抗体组成的组合物。这些公布还涉及含有与跨越下式所示Tat氨基酸残基41-50的“HIV-1 Tat表位2”序列内的表位特异性结合的分离抗体的其它抗体组合物：-Lys-X₄₂-Leu-Gly-Ile-Ser-Tyr-Gly-Arg-Lys-(SEQ ID NO：2)，其中，X₄₂是Gly或Ala。此外，这些公布涉及与跨越下式所示Tat氨基酸残基56-62的“HIV-1Tat表位3”序列内的表位特异性结合的分离抗体：-Arg-ATg-X₅₈-Z₅₉-A₆₀-Y₆₁-Ser-(SEQID NO：3)，其中，X₅₈是Ala、Pro、Ser或Gln，Z₅₉是Pro或His，A₆₀是Gln或Pro，Y₆₁是Asp、Asn、Gly或Ser，或是与跨越下式所示Tat氨基酸残基62-73的“HIV-1Tat表位4”序列内的表位特异性结合的分离抗体：-Ser-Gln-X₆₄-His-Gln-Y₆₇-Ser-Leu-Ser-Lys-Gln-Pro-(SEQ ID NO：4)，其中，X₆₄是Asn或Thr，Y₆₇是Ala或Val。

由这些抗体的组合，其中尤其包括一种表位1变体的抗体和分别结合不同表位1变体的一种或多种抗体的组合，以及这种表位1抗体和表位2抗体的其它组合，形成的组合物能够结合大量多种HIV-1毒株和亚型(B进化支和非B进化支)特有的Tat变体序列。这些抗体组合物被设计用来在感染初期和/或血清转化后病毒载量较低时抑制HIV-1感染，从而延迟发展成AIDS。再者，这些所得组合物或这种抗-Tat抗体的混合物具有可治疗病毒许多毒株和亚型的优点，因此不需要不同的、特异于毒株的治疗剂。