[实用新型]泰乐菌素残留快速检测试纸条

说明书

一、技术领域：

本实用新型涉及一种检测兽药的器具，特别是涉及一种泰乐菌素(Tylosin，简称TL)残留快速检测试纸条。

二、技术背景：

泰乐菌素是抗生素类药，用于革兰氏阴性细菌及支原体感染。从弗氏链霉菌的一类似菌株培养液中取得，为白色结晶，微溶于水，具弱碱性，一般成盐后易溶于水，泰乐菌素对革兰氏阳性菌和一些阴性菌有抗菌作用，对金黄色葡萄球菌、化脓链球菌、肺炎链球菌、化脓棒状杆菌均敏感。在蜂养殖、畜禽饲养过程中，兽药泰乐菌素不仅用于预防和控制畜禽、蜜蜂的疾病，并且具有促生长作用，是目前广泛添加于饲料中的药物，其耐药性问题日益突出，这是蜜蜂、奶牛、生猪、禽肉等产品变为非安全的食品的重要因素之一。欧盟早在1999年已经禁用泰乐菌素作为饲料添加剂使用，香港规定了畜禽肉品及牛奶、蜂蜜等产品中最高残留限量。我国禁用复方泰乐菌素，同时在中华人民共和国农业部公告(第278号)中严格规定了泰乐菌素在猪牛养殖中的停药期，我国首批绿色畜产品认证准则中《饲料和饲料添加剂准则》明确规定禁止使用泰乐菌素作为药物性饲料添加剂，无公害蜂产品规定了泰乐菌素残留检测的检测标准和方法，泰乐菌素现有的检测方法主要有高压液相色谱法、气相色谱法、气质连用法以及ELISA等。色谱技术是非常有效、准确、敏感的方法，但是待检样品需经一系列的预处理，繁琐费时，从样品预处理到得出检验结果至少需2～3天时间，检测费用很高。另一方面这种检测方法还必须有昂贵的仪器设备。只有特定的专业人员才能应用，而且每次检测的样品有限，不适应大批样品的筛查，严重阻碍了该检测方法的推广应用，更不适应于现场检验。ELISA也是一种常用的检测技术，它是以竞争性酶联反应为检测原理，检测全过程约需2-4小时。由于ELISA是一种敏感性很强的检测方法，不同的操作者往往会出现不同的结果，所以该方法常常造成人为的误检和漏检。因此在实际生产中急需一种快速检测泰乐菌素的检测方法。目前各级食品检验部门，尤其是外贸出口单位，加强了泰乐菌素的检测力度，以确保人民群众的动物性食品安全。因此研制灵敏、快速，准确的泰乐菌素检测方法，检测蜂蜜、牛奶及家畜家禽等产品和组织饲料中是否含泰乐菌素有着十分重要的意义。

三、实用新型内容：

本实用新型的目的：研制出特异、敏感、快速、简便的泰乐菌素残留快速检测试纸条。

本实用新型的技术方案：

一种泰乐菌素残留快速检测试纸条，底层为支撑层，中间层吸附层固定在支撑层上，外层保护膜固定在吸附层上，吸附层从测试端依次为纤维层，吸附金标抗体纤维层，纤维素膜层及手柄端的吸水材料层，其中在纤维素膜层上有用偶联泰乐菌素的载体蛋白溶液印制的直线式检测印迹，用羊抗或兔抗小鼠IgG溶液印制的直线式对照印迹，检测印迹和对照印迹平行组合排列为“‖”。

支撑层是用不吸水的硬质塑胶片条或硬纸条制成。

测试端纤维层用玻璃棉、或尼龙膜、或聚偏二氟乙烯(PVDF)膜、或聚酯膜制成，优选玻璃棉，吸水材料层用吸水纸制成。

纤维素膜层用硝酸纤维素膜、或纯纤维素膜，或羧化纤维素膜制成。

金标抗体纤维层用吸附泰乐菌素的金标抗体玻璃棉，泰乐菌素金标抗体为胶体金标记泰乐菌素的单克隆抗体或多克隆抗体，偶联泰乐菌素的载体蛋白溶液为泰乐菌素与载体蛋白偶联的复合溶液。

在测试端吸附纤维层、金标抗体纤维层及吸水材料层上覆盖有保护膜，在测试端纤维层与金标抗体纤维层交界处对应的保护膜上印制有样品标记线，该标记线偏向测试端纤维层一侧约0.5cm处。

偶联泰乐菌素的载体蛋白为牛血清白蛋白(BSA)，或为鸡卵清白蛋白(OVA)，或为铁蛋白，或为血蓝蛋白。

本实用新型的泰乐菌素残留快速检测试纸条具有以下优点：

(1)特异性强，敏感性高。该试纸条以胶体金标记高亲和力的单克隆抗体(W1)为基础制备而成，金标抗体中金颗粒与抗体分子之间无共价键形成，二者通过异性电荷间的范德华力相结合，胶体金标对单克隆抗体(W1)特异性和亲和力影响很小，且具有较高的标记率。因此，快速检测试纸条具有较高的特异性和敏感性，可检测到0.1纳克的微量TL残留。

(2)操作简便、快速。使用本实用新型试纸条时无需任何其它试剂，只要将其插入待检样品10秒左右，在2分钟内即可判定检测结果。