[发明专利]人苍白杆菌ZJB－061及其应用

说明书

(一)技术领域

本发明涉及从土壤中筛选到的微生物新菌株人苍白杆菌ZJB-061(Ochrobactrum anthropi ZJB-061)，及其在催化β-氨基丙腈制备β-氨基丙酸中的应用。

(二)背景技术

β-氨基丙酸是制备泛酸钙的重要中间体，维生素B₃(泛酸)由泛解酸和β-氨基丙酸组成，存在于一切组织之中，它是辅酶A的成分，是体内能量代谢中不可缺少的成分。泛酸参与碳水化合物、脂肪和蛋白质代谢，特别是对脂肪的合成与代谢起十分重要的作用。泛酸还是形成乙酰胆碱所必需的物质。缺乏泛酸可使动物生长速度下降，皮肤受损，神经系统紊乱，抗体形成受阻。

β-氨基丙酸还是合成肌肽、帕米磷酸钠、巴柳氮的前体。β-氨基丙酸还被应用于电镀，也用于微生物和生物化学等研究，它本身也可用于铅中毒解毒剂，还可用于合成甜味剂等。

生产β-氨基丙酸的方法有多种，目前研究较多的是化学法生产，主要有三种[徐克勋，精细有机化工原料及中间体手册，北京，化学工业出版社，2002，1998，445-446]：

1、丙烯腈法：

2、β-氨基丙腈法：

2NH₂CH₂CH₂CN+Ba(OH)₂→(NH₂CH₂CH₂COO)₂Ba+N₂

3、琥珀酰亚胺降解法(霍氏反应)：

以上三种方法均需强碱或强酸等参与反应，试剂损耗大，对环境不友好，而且收率不高。

由于此法存在着一系列化学法生产的缺点，因此利用生物技术法来来代替化学法是一种趋势。人们一直试图寻求一种生物技术的方法来生产β-氨基丙酸。

日本人及川等在土壤中分离到两株能将β-氨基丙腈分解为β-氨基丙酸的菌株产碱菌(Alcaligenes sp.)OMT-MY14和(aminobacter aminobrance)ATCC23314(公开特许公报：10-42885)。

(三)发明内容

本发明的目的是为了提供一株可将β-氨基丙腈水解为β-氨基丙酸的新的微生物菌株；其次是提供一种利用该微生物催化水解β-氨基丙腈生产β-氨基丙酸的方法。

为达到发明目的本发明采用的技术方案是：

人苍白杆菌ZJB-061(Ochrobactrum anthropi ZJB-061)，保藏于中国典型培养物保藏中心，保藏编号CCTCC No：M206039，保藏日期2006年4月14日，提议的分类命名为人苍白杆菌ZJB-061。

所述人苍白杆菌ZJB-061由如下方法筛选得到：

以β-氨基丙腈为唯一氮源，甘油为唯一碳源，加入基本的无机离子，从土样(采自杭州各个地方)中筛选具有水解β-氨基丙腈生产β-氨基丙酸的腈水解酶类活力的微生物菌株。

筛选培养基：甘油4g/L，MgCl₂ 0.4g/L，Na₂HPO₄ 2g/L，KH₂PO₄ 1g/L，灭菌后添加3mL/L的β-氨基丙腈。

(1)初筛

从浙江各个地区采集土壤样品，称取1.0g土壤，装入含50mL水的250mL三角瓶中，用玻璃珠打散，吸取1mL接入筛选培养基(250mL三角瓶，装液量50mL)，摇床培养(150rpm，30℃，96h)。

(2)复筛