[发明专利]肿瘤基因开关药物

说明书

技术领域：

肿瘤治疗药物。

背景技术：

从分子水平来看，肿瘤是涉及多基因活动异常的疾病，每种组织癌变或每种细胞表型都涉及数十乃至数百种基因活动。把哪个基因作为治疗靶点仍不明确。但现在已初步明晰，肿瘤的发生是多步骤多阶段进行的。与某一细胞表型相关基因群的活动是按时空有序进行的，有级联式表达规律，处于级联式下游的功能基因的活动是受上游的调控基因所控制。因此，通过改变上游的调控基因的活动异常，仍可以控制整个下游基因群的活动，进而使细胞表型从恶性表型恢复至良性表型，达到治愈肿瘤的目的。

上游的调控基因即是表达细胞核因子(DNA结合蛋白)的基因，包括肿瘤发生相关的原癌基因和抑癌基因。由于某些外界因素作用下，原癌基因激活而过度表达和抑癌基因的失活。即调控基因发生失控紊乱，本身表达调控失常，并引发其他下游基因调控及表达失常的连锁反应，导致肿瘤发生，因此，原癌基因、抑癌基因是肿瘤基因治疗的重要靶点。

肿瘤细胞一个特征是原癌基因过度表达，其中c-myc在髓性白血病、B淋巴瘤、T淋巴瘤、肉瘤等多种肿瘤均有高表达，并在白血病、乳腺癌、胃癌、小细胞肺癌、结肠癌、神经细胞瘤、胶质母细胞瘤、视网膜母细胞癌均有不同程度的扩增。在人肝癌细胞低甲基化引起过度表达。c-fos在骨肉瘤、淋巴瘤等过度表达。c-jun在小细胞性肺瘤和非小细胞性肺癌、结肠直肠癌高表达。在肿瘤的启动、促瘤阶段，有c-myc、c-jun的高表达(与肿瘤发生有关)。

肿瘤细胞另一特征：失去细胞周期特异性，失去对细胞增殖信号的反应能力，而c-myc过度表达是细胞增殖的前提之一。MYC-MAX异二聚体结合于E-box，激活本身及下游通讯基因CYC25A等表达，形成细胞增殖表型，并与E2F共同作用，激活cyclinA、cyclin E，在细胞周期中G1→S期的转化是起关键作用。c-myc还可活化端粒酶的表达，在促进肿瘤形成上起重要作用。c-jun和c-fos在RAS信号传导途径的下游核相中起重要作用。(被称为早期快速反应基因或第三信使)。c-myc和c-fos在细胞分化中起重要作用。此外，c-myc、c-fos、c-jun在细胞凋亡、基因组稳定、细胞成熟中有重要作用。因此，改变c-myc、c-fos、c-jun的调控异常，从而可以改变恶性增殖表型为良性表型，

原癌基因和抑癌基因在正常细胞和肿瘤细胞同时存在，不同的是两类细胞中的表达程度不同，肿瘤细胞是原癌基因过度表达，是正常细胞的2～10倍，且抑癌基因失活。这说明基因的表达调控出现了异常，这种异常是基因的调控区上顺反式因子结合状态及数量的发生了改变，如何消除这种异常，改变基因调控状态，目前世界上有一种新的策略即转录因子“诱饵”(decoy)的方法，用特异性的DNA序列结合转录调控因子(包括原癌基因上增强子上的转录激活因子和抑癌基因沉默子上的转录抑制因子)，改变调控基因的表达状态，从而改变细胞表型。

人们在DNA与蛋白质相互作用关系的基础研究中，已发现并证实：体外合成一段序列特异的短链DNA，可与细胞核蛋白提取物中某一种因子结合，在聚丙烯酰胺电泳中产生凝胶阻抑现象，为现在decoy核酸发展成为药物提供了实验基础。自从90年代来，Bielinska(1990)提出用双链寡聚核酸调控基因表达以来，decoy核酸已首先用于在治疗心血管药物开发，用E2F因子的decoy核酸治疗静脉搭桥术后血管的内膜增生(Mann.et al1999)已进入临床，用NF-Kappaβ的decoy核酸防治心肌梗塞(Sawa.1997.Tounita.1998)，还有AGE、SRF的decoy核酸等。decoy核酸应用于肿瘤治疗刚处于起步阶段，如：CREB因子的decoy核酸(Cho-chong 1999)已在多种肿瘤细胞株及动物模型开展。ER的decoy核酸(PivaR et al 2000)用于抑制乳腺癌细胞生长。NF-Kappaβ的decoy核酸(Sharma.HW etal)在小鼠纤维瘤体内外试验取得一定抑制效果。

发明内容：

本发明的目的之一是提供肿瘤基因开关药物，其特征是一系列序列特异的decoy核酸，可特异性结合各自转录调控因子。下调过度表达的癌基因c-fos、c-jun、c-myc，从而抑制肿瘤细胞的恶性增殖，达到治疗肿瘤的目的。

本发明的另一目的是提供含有本发明decoy核酸药物组合物。

本发明的另一目的是本发明decoy核酸用于制备抗肿瘤药物的用途。

本发明的目的可以通过以下措施来达到：