[发明专利]版纳霉素

说明书

本发明涉及一种新的化合物，特别是一种从微生物发酵产物中提取的版纳霉素。

来源于微生物次生及其代谢产物的抗生素，在临床医学中除广泛用于治疗各种微生物感染性疾病外，它们中一些具有新颖生理活性的新物质如酶抑制型抗生素，抗肿瘤，抗HIV类抗生素等的研究也越来越受到人们的重视，对它们的研究正在成为该领域的一个研究方向。对它们的研究和开发不仅可以扩展微生物抗生素的适用范围，也是人们面对“现代疾病”新形势作出的抉择。

本发明的目的是提供一种新的具有酶抑制功能的化合物。

本发明的技术方案是这样的：版纳霉素，英文名为：4，4-Dimethyl-3，4-dihydro-2H-phthalazim-1-one，其特征在于：分子式为：C₁₀H₁₂N₂O  分子量为：176结构式为其物化特征是：外观：无色针状结晶，熔点：117～118℃，熔点测定用微熔点测定仪(YANAGIMOTO MFG，CO.)温度未校正。红外吸收：(KBr压片，v_max)：3334，3171，2970，2922，2863，1658，1650，1612，1579，1513，1486，1420，1389，1362，1329，1277，1187，1149，808，750，701，512，471cm^-1，以上数据系由Bio-Rad FTS-135红外线扫描仪所得。¹H-NMR核磁共振谱：溶解溶剂C₅D₅N，400MHz，δ：ppm8.87(1H，s-NH-)，8.70(1H，s-NH-)，6.8～8.3(4H，m，苯环上的H)，1.64(6H，s，-CH₃)；¹³C-核磁共振：溶解溶剂C₅D₅N，100MHz，δ：ppm164.7(s，C＝O)，148.2(s，C-1)，115.6(s，C-2)，115.1(d，C-3)，128.6(d，C-4)，117.6(d，C-5)，133.9(d，C-6)，67.8(s，CH₃-C-CH₃)，29.7(q，-CH₃)。EI+MS：176[M]⁺(23)，161[M-CH₃]⁺(100)，135(20)，120(45)，119(23)，92(82)，91(54)，84(32)，77(12)，65(35)，56(24)，52(17)

本发明所述的版纳霉素按下面的方法步骤获得：取微生物JX-42菌株，菌株在斜面培养基上培养10天，转到种子培养基中进行液体培养(用500ml的三角烧瓶做培养瓶，每瓶装100ml培养基)。液体培养基由2％的大豆饼粉，4％的淀粉，0.4％的NaCl和0.5％的CaCO₃组成(重量体积比)，pH值自然。种子液在28℃，600转/分的摇床上培养48小时，尔后转移到发酵培养基中进行培养(用500ml的三角烧瓶做培养瓶，每瓶装100ml培养基)。发酵培养基的组成如下(重量体积比)：5％葡萄糖，0.5％玉米浆，1.5％大豆粉，1.0％酵母膏，1.0％ NaCl，0.3％CaCO₃；灭菌前用0.1M NaOH水溶液调至pH7.0～7.2。菌株在28℃，550转/分的摇床上发酵培养144小时；发酵培养液取下后，3000转/分离心，过滤。上清液用乙酸乙酯萃取三次。回收有机相，菌丝体用70％甲醇提取三次，所得粗提物用硅胶G柱层析的方法进行分离和纯化。获得以上化合物。

本发明的微生物菌株JX-42是从我国云南省关坪自然保护区的土壤样品中分离得到。

该菌株JX-42形态和培养特征是：分离菌种所用培养基为HV培养基：腐殖酸1.0g(在研钵里研碎之后，加入10ml 0.2N NaOH，再研磨；放置过夜，加入500毫升水，转入烧杯里加热煮沸，离心或静置，调pH)，Na₂HPO₄0.5g，KCl 1.7g，MgSO₄·7H₂O 0.05g，FeSO₄·7H₂O 0.01g，CaCl₂ 1g，琼脂18g，维生素B，放线菌酮50mg，其他抗生素或萘啶酮酸20mg；pH 7.2。分离方法用稀释平板法。