[发明专利]一种新的多肽——伴肌动蛋白18.15和编码这种多肽的多核苷酸

说明书

本发明属于生物技术领域，具体地说，本发明描述了一种新的多肽——伴肌动蛋白18.15，以及编码此多肽的多核苷酸序列。本发明还涉及此多核苷酸和多肽的制备方法和应用。

伴肌动蛋白是一种异常巨大的蛋白，特异性存在于脊椎动物骨骼肌中，大约占据了那儿骨骼肌纤维蛋白总量的3％(Wang & Wright，1988)。序列测定显示，伴肌动蛋白有大约35个氨基酸残基的重复序列结构，排列组合成7重折叠的超重复形式(Labeit et al.，1991)。伴肌动蛋白的这种排列方式使得细丝之间保持紧密的接触，而且伴肌动蛋白的大小与细丝的长度是相关的(Kruger et al.，1991；Labeit et al.，1991)。

脊椎动物的细丝也排列为7重折叠重复序列，在每38.5nm长度的细丝上，存在的肌钙蛋白、原肌球蛋白和肌动蛋白在化学计量上都遵循1∶1∶7的比率。由于伴肌动蛋白与细丝系统的紧密接触，伴肌动蛋白的合成和表达方式与细丝相关(Pfuhl et al.，1994；Jin & Wang，1991；Chen et al.，1993)，并且伴肌动蛋白能够结合到肌动蛋白上。

伴肌动蛋白的大小从600KDa到900KDa不同，随着组织、物种和个体发育阶段的不同而不同(Hu et al.，1986；Locker & Wild，1986)，并且存在不同的异构形式。伴肌动蛋白的每一个重复序列上含有推定的肌动蛋白结合序列SDXXYK，并且还含有另外一些保守的序列，比如WLKGIGW结构域的存在，解释了肌钙蛋白和原肌球蛋白如何周期性地结合到38.5nm的细丝重复序列上。起始的两个超重复序列SR1/SR2没有了WLKGIGW结构域，与其它的超重复序列不同，它们起始于77个残基的独特序列，与其它蛋白没有序列同源性。在伴肌动蛋白的C末端的900个残基中不存在超重复序列。在伴肌动蛋白的C末端存在一个SH3区域，与酵母肌动蛋白结合蛋白ABP-1的SH3区域高度相似，它们都涉及肌动蛋白进入到细胞骨架和非肌肉细胞的调节作用。

通过基因芯片的分析发现，在正常脑、肝癌、肌肉、胎脑、胎肾，胎肺、胎肝、甲状腺、胸腺、成人肝、肺、胶质瘤中，本发明的多肽的表达谱与伴肌动蛋白的表达谱非常近似，因此二者功能也可能类似。本发明被命名为伴肌动蛋白18.15。

由于如上所述伴肌动蛋白18.15蛋白在调节细胞分裂和胚胎发育等机体重要功能中起重要作用，而且相信这些调节过程中涉及大量的蛋白，因而本领域中一直需要鉴定更多参与这些过程的伴肌动蛋白18.15蛋白，特别是鉴定这种蛋白的氨基酸序列。新伴肌动蛋白18.15蛋白编码基因的分离也为研究确定该蛋白在健康和疾病状态下的作用提供了基础。这种蛋白可能构成开发疾1病诊断和/或治疗药的基础，因此分离其编码DNA是非常重要的。

本发明的一个目的是提供分离的新的多肽——伴肌动蛋白18.15以及其片段、类似物和衍生物。

本发明的另一个目的是提供编码该多肽的多核苷酸。

本发明的另一个目的是提供含有编码伴肌动蛋白18.15的多核苷酸的重组载体。

本发明的另一个目的是提供含有编码伴肌动蛋白18.15的多核苷酸的基因工程化宿主细胞。

本发明的另一个目的是提供生产伴肌动蛋白18.15的方法。

本发明的另一个目的是提供针对本发明的多肽——伴肌动蛋白18.15的抗体。

本发明的另一个目的是提供了针对本发明多肽——伴肌动蛋白18.15的模拟化合物、拮抗剂、激动剂、抑制剂。

本发明的另一个目的是提供诊断治疗与伴肌动蛋白18.15异常相关的疾病的方法。

本发明涉及一种分离的多肽，该多肽是人源的，它包含：具有SEQ ID No.2氨基酸序列的多肽、或其保守性变体、生物活性片段或衍生物。较佳地，该多肽是具有SEQ ID NO：2氨基酸序列的多肽。

本发明还涉及一种分离的多核苷酸，它包含选自下组的一种核苷酸序列或其变体：

(a)编码具有SEQ ID No.2氨基酸序列的多肽的多核苷酸；

(b)与多核苷酸(a)互补的多核苷酸；

(c)与(a)或(b)的多核苷酸序列具有至少70％相同性的多核苷酸。

更佳地，该多核苷酸的序列是选自下组的一种：(a)具有SEQ ID NO：1中337-834位的序列；和(b)具有SEQ ID NO：1中1-1038位的序列。