[发明专利]一种新的多肽——尿嘧啶焦磷酸酶9.02和编码这种多肽的多核苷酸

说明书

本发明属于生物技术领域，具体地说，本发明描述了一种新的多肽——尿嘧啶焦磷酸酶9.02，以及编码此多肽的多核苷酸序列。本发明还涉及此多核苷酸和多肽的制备方法和应用。

在生物体的DNA合成过程中，尿嘧啶(dUTP)很可能被DNA聚合酶当作dTTP被掺入到DNA链中，造成错误掺入，从而导致修复损伤、DNA的破碎和细胞凋亡等很多结果。

在生物合成嘧啶过程中产生的尿嘧啶是尿嘧啶焦磷酸酶的底物，尿嘧啶焦磷酸酶的作用是催化水解尿嘧啶，使其成为dUMP和PPi，从而控制尿嘧啶在细胞内的水平。(J Mol Biol(1999)288，275-287)

当胞内的尿嘧啶水平持续提高时，一连串的过程最终会导致损伤修复位点交迭、不可逆的DNA破碎、细胞凋亡等结果。因此，通过尿嘧啶焦磷酸酶来控制尿嘧啶的胞内水平对生物体来讲是不可缺少的。

根据光亲和标记和定点诱变的结果，已经发现尿嘧啶焦磷酸酶有一个beta-发卡结构域(beta-hairpin motif)，以及一些有特定功能的氨基酸残基，这些结构域目前研究得不是很清楚，但它们被推测与尿嘧啶焦磷酸酶的活性、尿嘧啶焦磷酸酶与尿嘧啶的结合等等有关。研究的结果证明，尿嘧啶焦磷酸酶的活性和与尿嘧啶结合的作用在很大程度上都与beta-hairpin motif的芳香族侧链结构有关。(J Mol Biol(1999)288，275-287)

根据研究，叶酸盐激动剂/拮抗剂和胸苷酸合成酶抑制剂的抗肿瘤作用都与尿嘧啶的错误掺入有关。而尿嘧啶的水平是由尿嘧啶焦磷酸酶来调控的，因此，尿嘧啶焦磷酸酶的活性是化学治疗和抗反向病毒治疗的关键。(J Mol Biol(1999)288，275-287)

研究还发现，尿嘧啶焦磷酸酶在肺癌、结肠癌等病人的组织内表达量特别低，因此，可以利用这些疾病对尿嘧啶焦磷酸酶抑制剂的极度敏感而使其得以治疗。

特别要提及的是，人内生反向病毒(HERV)编码的一种尿嘧啶焦磷酸酶，已被推测为HIV感染的协助成分，因此，它也是抑制HIV感染的有效靶蛋白。(J MolBiol(1999)288，275-287)

通过基因芯片的分析发现，在正常脑、肝癌、肌肉、胎脑、胎肾，胎肺、胎肝、甲状腺、胸腺、成人肝、肺、胶质瘤中，本发明的多肽的表达谱与尿嘧啶焦磷酸酶的表达谱非常近似，因此二者功能也可能类似。本发明被命名为尿嘧啶焦磷酸酶9.02。

由于如上所述尿嘧啶焦磷酸酶9.02蛋白在调节细胞分裂和胚胎发育等机体重要功能中起重要作用，而且相信这些调节过程中涉及大量的蛋白，因而本领域中一直需要鉴定更多参与这些过程的尿嘧啶焦磷酸酶9.02蛋白，特别是鉴定这种蛋白的氨基酸序列。新尿嘧啶焦磷酸酶9.02蛋白编码基因的分离也为研究确定该蛋白在健康和疾病状态下的作用提供了基础。这种蛋白可能构成开发疾1病诊断和/或治疗药的基础，因此分离其编码DNA是非常重要的。

本发明的一个目的是提供分离的新的多肽——尿嘧啶焦磷酸酶9.02以及其片段、类似物和衍生物。

本发明的另一个目的是提供编码该多肽的多核苷酸。

本发明的另一个目的是提供含有编码尿嘧啶焦磷酸酶9.02的多核苷酸的重组载体。

本发明的另一个目的是提供含有编码尿嘧啶焦磷酸酶9.02的多核苷酸的基因工程化宿主细胞。

本发明的另一个目的是提供生产尿嘧啶焦磷酸酶9.02的方法。

本发明的另一个目的是提供针对本发明的多肽——尿嘧啶焦磷酸酶9.02的抗体。

本发明的另一个目的是提供了针对本发明多肽——尿嘧啶焦磷酸酶9.02的模拟化合物、拮抗剂、激动剂、抑制剂。

本发明的另一个目的是提供诊断治疗与尿嘧啶焦磷酸酶9.02异常相关的疾病的方法。

本发明涉及一种分离的多肽，该多肽是人源的，它包含：具有SEQ ID No.2氨基酸序列的多肽、或其保守性变体、生物活性片段或衍生物。较佳地，该多肽是具有SEQ ID NO：2氨基酸序列的多肽。

本发明还涉及一种分离的多核苷酸，它包含选自下组的一种核苷酸序列或其变体：

(a)编码具有SEQ ID No.2氨基酸序列的多肽的多核苷酸；

(b)与多核苷酸(a)互补的多核苷酸；

(c)与(a)或(b)的多核苷酸序列具有至少70％相同性的多核苷酸。