[发明专利]一种新的多肽——人锌指蛋白9.24和编码这种多肽的多核苷酸

说明书

本发明属于生物技术领域，具体地说，本发明描述了一种新的多肽——人锌指蛋白9.24，以及编码此多肽的多核苷酸序列。本发明还涉及此多核苷酸和多肽的制备方法和应用。

本发明属于生物技术领域，具体地说，本发明描述了一种新的多肽——人锌指蛋白9.24，以及编码此多肽的多核苷酸序列。本发明还涉及此多核苷酸和多肽的制备方法和应用。

真核基因的转录调控对于基因的正常表达及发挥正常生物学功能是十分重要的，通常由转录调控因子来完成这一调节过程。转录调控因子在生物体内参与决定基因在何种组织及何种发育阶段开始转录，编码这类蛋白的基因如发生突变，不但该基因自身不能正常表达，而且受其调节的许多基因也不能正常的进行转录与表达。转录因子对基因表达的调控主要通过转录因子与特定的DNA序列结合、转录因子间的相互作用及转录因子与常规转录机构的相互作用在完成。根据结构基序的不同，已知的DNA结合蛋白可主要分为两类：含有螺旋-转角-螺旋基序的蛋白及锌指蛋白[Kamal Chowdhury，Heidi Rohdewohld et al.，Nucleic AcidsResearch，1988，16：9995-10011]。

锌指蛋白为编码锌离子介导的核苷酸结合蛋白多基因家族中的成员，锌指蛋白的锌指结构主要有以下几种：C2H2构型、C2C2构型、C2HC构型、C2HC4C构型、C3H构型、C3HC4构型(Dai KS et al.，1998)。人们已从酵母、果蝇、鼠及人等多种生物体中分离得到了各种构型的锌指蛋白，其中含C2H2构型的锌指蛋白基因构成人类基因组最大的一族基因(Berker et al.，1995)。C2H2型锌指蛋白与基因的转录活化及抑制有关，这些蛋白的表达异常将引发各种发育紊乱性疾病、各种肿瘤的发生、各种遗传性疾病及免疫系统疾病[KamalChowdhury，Heidi Rohdewohld et al.，Nucleic Acids Research，1988，16：9995-10011]。

所有的C2H2型锌指蛋白均含有28-30个氨基酸长的保守的指重复序列(F/Y)XCXXCXXXFXXXXXLXXHXXXHTGEKP，其中一些特定的氨基酸残基位点为高度保守的。这一序列在很多不同的锌指蛋白中均含有多个拷贝，其拷贝数不同(锌指个数不同)则功能也不同。锌指蛋白与不同长度的DNA的结合依赖于指结构的数量，多指结构可能与复合物的结合稳定性有关，而复合物是RNA聚合酶转录的作用位点。研究发现，许多锌指蛋白的锌指结构域相互连接区域也是高度保守的，这一区域通常含有下列序列：His-Thr-Gly-Gly-Lys-Pro-(Tyr，Phe)-X-Cys，其中组氨酸与半胱氨酸为金属离子的结合位点，而X为可变氨基酸残基。这一区域对于锌指结构的形成是必需的，指结构的数量将直接影响锌指蛋白与不同长度的DNA结合，且多指结构与转录调节复合物的结合稳定性有关[Jeremy M.Berg，Annu.Rev.Biophys.Chem，1990，19：405-421]。

C2H2型锌指蛋白按其不同的结构特征又可分为不同的蛋白家族，Kruppel相关的锌指蛋白就是其中分布最广的一种。其蛋白序列中亦含有如上所述的C2H2型锌指蛋白的特征性结构基序，且在生物体内有着与之相似的生理学功能。其在生物体内通过调控各组织基因的表达来调节细胞的分裂与发育[Jeremy M.Berg，Annu.Rev.Biophys.Chem，1990，19：405-421]。

本发明的新的人锌指蛋白与已知的人锌指蛋白ZNF11B在蛋白水平上有50％的同一性和61％的相似性，因而两者同为人C2H2型锌指蛋白Kruppel家族的成员，并具有相似的生物学功能。人锌指蛋白ZNF11B定位于第10条染色体上，其在生物体内与一些基因、基因组的复制及染色体的重排等过程相关[Tunnacliffe A，Liu L et al.，1993，Nucleic Acids Res，21：1409-1417]。本发明的新的人锌指蛋白与ZNFIIS蛋白相似，亦在生物体内调控着一些基因及基因组的复制及染色体重排过程，该蛋白的表达异常将导致一些基因的异常增殖，从而引发一些相关组织的发育紊乱症、相关组织的肿瘤及癌症等。该蛋白可用于诊断及治疗相关组织的肿瘤及癌症、发育紊乱性疾病、血液系统疾病及神经系统疾病等。