[发明专利]人类成年星形胶质细胞,它们的制备及应用无效
| 申请号: | 00802570.3 | 申请日: | 2000-01-05 |
| 公开(公告)号: | CN1340098A | 公开(公告)日: | 2002-03-13 |
| 发明(设计)人: | J-L·里戴特;J·玛莱特 | 申请(专利权)人: | 阿文蒂斯药物股份有限公司 |
| 主分类号: | C12N5/06 | 分类号: | C12N5/06;C12N5/10;A61K48/00 |
| 代理公司: | 中国国际贸易促进委员会专利商标事务所 | 代理人: | 黄革生 |
| 地址: | 法国*** | 国省代码: | 暂无信息 |
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| 摘要: | |||
| 搜索关键词: | 人类 成年 星形 胶质 细胞 它们 制备 应用 | ||
1.一种制备基本上纯的星形胶质细胞群体的方法,该方法包括:
a)将星形胶质细胞制备物导入到培养器皿中,
b)在能使星形胶质细胞贴附到培养器皿上的条件下,孵育由步骤a)得到的星形胶质细胞,和
c)由步骤a)的开始算起,在大约第48小时时,去除那些尚未贴附到培养器皿上的细胞。
2.根据权利要求1的方法,其中星形胶质细胞是人类星形胶质细胞。
3.根据权利要求2的方法,其中人类星形胶质细胞是人类成年星形胶质细胞。
4.根据权利要求1的方法,那里所述基本上纯的星形胶质细胞群体基本上没有小胶质细胞。
5.根据权利要求1的方法,其中星形胶质细胞是通过外科切除术从患者得到的原始星形胶质细胞。
6.根据权利要求1的方法,其中未贴壁的细胞是通过更换培养液从培养器皿内去除的。
7.根据权利要求1的方法,进一步包括一个导入核酸到星形胶质细胞内的步骤d)。
8.根据权利要求7的方法,其中核酸是通过病毒载体导入到星形胶质细胞内的。
9.根据权利要求8的方法,其中病毒载体选自腺病毒、疱疹病毒、AAV、反转录病毒和痘苗病毒。
10.根据权利要求9的方法,其中病毒载体是复制缺陷的腺病毒载体。
11.根据权利要求7的方法,其中核酸是通过磷酸钙沉淀、脂质体介导的转染、阳离子脂质转染或脂多胺介导的转染导入到星形胶质细胞内的。
12.根据权利要求7的方法,其中核酸编码神经活性物质。
13.通过权利要求1的方法产生的基本上纯的星形胶质细胞群体。
14.基本上纯的星形胶质细胞群体。
15.根据权利要求14的星形胶质细胞群体,其中星形胶质细胞是人类星形胶质细胞。
16.根据权利要求15的星形胶质细胞群体,其中人类星形胶质细胞是人类成年星形胶质细胞。
17.根据权利要求16的星形胶质细胞群体,其中所述星形胶质细胞群体基本上没有小胶质细胞。
18.根据权利要求14的星形胶质细胞群体,其中星形胶质细胞是通过外科切除术从患者得到的原始星形胶质细胞。
19.根据权利要求14的星形胶质细胞群体,进一步包含外源核酸。
20.根据权利要求19的星形胶质细胞群体,其中核酸是通过病毒载体导入到星形胶质细胞内的。
21.根据权利要求20的星形胶质细胞群体,其中病毒载体选自腺病毒、疱疹病毒、AAV、反转录病毒和痘苗病毒。
22.根据权利要求21的星形胶质细胞群体,其中病毒载体是复制缺陷的腺病毒载体。
23.根据权利要求19的星形胶质细胞群体,其中核酸是通过磷酸钙沉淀、脂质体介导的转染、阳离子脂质转染或脂多胺介导的转染导入到星形胶质细胞内的。
24.根据权利要求19的星形胶质细胞群体,其中核酸编码神经活性物质。
25.根据权利要求19的星形胶质细胞群体,其中所述核酸是DNA或RNA。
26.根据权利要求25的星形胶质细胞群体,其中所述核酸是编码蛋白质、多肽或肽的DNA。
27.根据权利要求26的星形胶质细胞群体,其中所述蛋白质、多肽或肽选自生长因子、神经营养因子和酶。
28.根据权利要求25的星形胶质细胞群体,其中所述核酸是编码反义RNA或核酶的DNA。
29.根据权利要求24的星形胶质细胞群体,其中所述核酸可操作地与调节区相连。
30.根据权利要求29的星形胶质细胞群体,其中调节区包含可调节的启动子、可诱导的启动子、神经细胞特异性启动子或病毒启动子。
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