[发明专利]一种新的多肽——可溶性环氧化物酶10.78和编码这种多肽的多核苷酸

说明书

本发明属于生物技术领域，具体地说，本发明描述了一种新的多肽——可溶性环氧化物酶10.78，以及编码此多肽的多核苷酸序列。本发明还涉及此多核苷酸和多肽的制备方法和应用。

环氧化物酶EH(EC3.3.2.3)是一个酶家族，它们将各种内源和外源的环氧化物水解为相应的二醇。

环氧化物酶在生物体内广泛存在，在所有已经检测的动物的各种组织中都能发现环氧化物酶，其中以肝脏和肾脏的含量最高[Wixtrom and Hammock Pharm--acology and Toxicology(Zakim，D.and Vessey，D.A.，ed.)1：1-93，Wiley，New York，1985]。现在已经知道有四种主要的环氧化物酶：白细胞三烯环氧化物酶，胆固醇环氧化物酶，微粒体环氧化物酶和可溶性环氧化物酶(sEH)。其中微粒体环氧化物酶和sEH存在于哺乳动物中。sEH蛋白包含一个称为domain I的结构域，由8个平行的β-链和交错于其中的6个α螺旋构成。Asp³³³，Asp⁴⁹⁵，His⁵²³构成了酶催化的关键位点。

sEH在解除环氧化物的毒性方面发挥重要作用。环氧化物是强电子供体，反应活性很强。环氧化物也是生物体正常新陈代谢的产物、副产物或中间产物，同时也是膜磷脂自发氧化的产物[Brash，et.al.，Proc.Natl.Acad.Sci.，85：3382-3386(1988)，and Sevanian，A.，et.al.，Molecular Basis ofEnvironmental Toxicology(Bhatnager，R.S.，ed.)pp.213-228，Ann AlgorScience，Michigan(1980)]。在细胞毒剂、化学诱变剂和致癌剂中都发现了环氧化物的存在[Sugiyama，S.，et.al.，Life Sci.40：225-231(1987)]。具有环氧化物功能的化合物广泛应用于杀虫剂、化学避孕剂和工业原材料中，因而成为了一种常见的环境污染物质。sEH的解毒反应减小环氧化物的疏水性，增强极性从而成为易于分泌的物质。另外，sEH在人白细胞中降低姊妹染色单体交换的概率[Kramer，A.，et.al.，Biochem.Pharmacol.42：2147-2152(1991)]。sEH的另一个作用是形成或降解内源性的化学中间产物。

Buehler等(1990)发现服用苯妥英的母亲的羊膜细中的环氧化物酶活性偏低。这可能是这类母亲所生婴儿先天性畸形的一个影响因素。环氧化物酶还跟炎症反应有关。环氧化物酶也在肝脏和肾脏的解毒反应中起作用，可以减轻或消除由于细胞毒剂、化学诱变剂和致癌剂所导致的细胞损伤、各种炎症反应、基因突变和癌症等。

通过基因芯片的分析发现，在正常脑、肝癌、肌肉、胎脑、胎肾，胎肺、胎肝、甲状腺、胸腺、成人肝、肺、胶质瘤中，本发明的多肽的表达谱与可溶性环氧化物酶的表达谱非常近似，因此二者功能也可能类似。本发明被命名为可溶性环氧化物酶10.78。

由于如上所述可溶性环氧化物酶10.78蛋白在调节细胞分裂和胚胎发育等机体重要功能中起重要作用，而且相信这些调节过程中涉及大量的蛋白，因而本领域中一直需要鉴定更多参与这些过程的可溶性环氧化物酶10.78蛋白，特别是鉴定这种蛋白的氨基酸序列。新可溶性环氧化物酶10.78蛋白编码基因的分离也为研究确定该蛋白在健康和疾病状态下的作用提供了基础。这种蛋白可能构成开发疾1病诊断和/或治疗药的基础，因此分离其编码DNA是非常重要的。

本发明的一个目的是提供分离的新的多肽——可溶性环氧化物酶10.78以及其片段、类似物和衍生物。

本发明的另一个目的是提供编码该多肽的多核苷酸。

本发明的另一个目的是提供含有编码可溶性环氧化物酶10.78的多核苷酸的重组载体。

本发明的另一个目的是提供含有编码可溶性环氧化物酶10.78的多核苷酸的基因工程化宿主细胞。

本发明的另一个目的是提供生产可溶性环氧化物酶10.78的方法。

本发明的另一个目的是提供针对本发明的多肽——可溶性环氧化物酶10.78的抗体。

本发明的另一个目的是提供了针对本发明多肽——可溶性环氧化物酶10.78的模拟化合物、拮抗剂、激动剂、抑制剂。

本发明的另一个目的是提供诊断治疗与可溶性环氧化物酶10.78异常相关的疾病的方法。