[发明专利]一种新的多肽——整合蛋白10.34和编码这种多肽的多核苷酸

说明书

本发明属于生物技术领域，具体地说，本发明描述了一种新的多肽——整合蛋白10.34，以及编码此多肽的多核苷酸序列。本发明还涉及此多核苷酸和多肽的制备方法和应用。

整合蛋白为一种与细胞粘合有关的受体家族。它位于细胞表面，介导细胞-细胞以及细胞-基质相互作用是由几种不同的受体家族介导的。这些受体蛋白除了能够将细胞靶至细胞外基质以及相邻细胞上的特异蛋白上之外，还参与许多重要的生理过程包括细胞生长，细胞分化，细胞连接形成，以及细胞极性化等等。现在已经发现了几种与细胞粘合有关的受体家族，包括：1、整合蛋白；2、免疫球蛋白超家族的粘合分子，参与细胞-细胞粘合以及在胚胎发生，伤口愈合以及炎症反应中起非常重要的作用；3、LEC-CAMs蛋白，包含类外源凝集素的结构域，介导白细胞/内皮细胞粘合；4、钙粘着蛋白；5、归家受体(homing receptors)，介导淋巴细胞于特异的淋巴组织的结合。

整合蛋白(Integrin)是细胞表面受体的一个大家族，介导细胞-细胞以及细胞-基质的附着。这种细胞-细胞以及细胞-基质相互作用对细胞的增殖以及分化有重要意义。整合蛋白还可以提高细胞生存的几率。研究发现，阻断整合蛋白与细胞外基质特定的成分的粘合会导致细胞死亡。【Cancer Metastasis Rev.14，191-203】最近发现，在小鼠中，特定整合蛋白的缺乏会导致肌肉细胞的退化性疾病，说明了整合蛋白在肌肉细胞存活中的重要作用。【Nat.Genet.17，318-323】

在整合蛋白结合到细胞外的配体上时，会激活细胞内信号级联反应。这说明整合蛋白是一种真正的信号分子。【Science 268，233-239】整合蛋白所激活的细胞内传导通路随着整合蛋白与配体的不同以及细胞种类的不同而变化。整合蛋白所介导的信号通路的最初反应是在结合部位形成整合蛋白的集聚，然后引起桩蛋白(paxillin)，踝蛋白(talin)以及焦点粘合激酶(FAK)1等蛋白的酪氨酸磷酸化。FAK是在加速细胞扩散和细胞存活的信号调控中的关键酶。【Proc.Natl.Acad.Sci.U.S.A.89，5192-5196】

有些整合蛋白识别细胞外基质蛋白配体的R-G-D序列。整合蛋白包含一个由α链和β链组成的二聚物。每个亚基包含一个大的N端胞外结构，后接一个跨膜区域和一个短的C端胞内区域。有些受体的β链相同，但α链不同。所有的整合蛋白的β链的细胞外部分的N端包含四个由40氨基酸残基所构成的重复序列。每个重复序列都含有8个半胱氨酸。下面一段序列包含5个这样的保守半胱氨酸，可以作为整合蛋白的特征序列：C-x-[GNQ]-x(1，3)-G-x-C-x-C-x(2)-C-x-C，其中的五个C可能参与形成二硫键。

通过基因芯片的分析发现，在正常脑、肝癌、肌肉、胎脑、胎肾，胎肺、胎肝、甲状腺、胸腺、成人肝、肺、胶质瘤中，本发明的多肽的表达谱与整合蛋白的表达谱非常近似，因此二者功能也可能类似。本发明被命名为整合蛋白10.34。

由于如上所述整合蛋白10.34蛋白在调节细胞分裂和胚胎发育等机体重要功能中起重要作用，而且相信这些调节过程中涉及大量的蛋白，因而本领域中一直需要鉴定更多参与这些过程的整合蛋白10.34蛋白，特别是鉴定这种蛋白的氨基酸序列。新整合蛋白10.34蛋白编码基因的分离也为研究确定该蛋白在健康和疾病状态下的作用提供了基础。这种蛋白可能构成开发疾1病诊断和/或治疗药的基础，因此分离其编码DNA是非常重要的。

本发明的一个目的是提供分离的新的多肽——整合蛋白10.34以及其片段、类似物和衍生物。

本发明的另一个目的是提供编码该多肽的多核苷酸。

本发明的另一个目的是提供含有编码整合蛋白10.34的多核苷酸的重组载体。

本发明的另一个目的是提供含有编码整合蛋白10.34的多核苷酸的基因工程化宿主细胞。

本发明的另一个目的是提供生产整合蛋白10.34的方法。

本发明的另一个目的是提供针对本发明的多肽——整合蛋白10.34的抗体。

本发明的另一个目的是提供了针对本发明多肽——整合蛋白10.34的模拟化合物、拮抗剂、激动剂、抑制剂。

本发明的另一个目的是提供诊断治疗与整合蛋白10.34异常相关的疾病的方法。

本发明涉及一种分离的多肽，该多肽是人源的，它包含：具有SEQ ID No.2氨基酸序列的多肽、或其保守性变体、生物活性片段或衍生物。较佳地，该多肽是具有SEQ ID NO：2氨基酸序列的多肽。