[发明专利]一种血液分析用无氰溶血济

说明书

本发明公开了一种血液分析用溶血剂，特别是指一种血液分析用无氰溶血剂。

溶血剂是医学检验中血液分析仪最常用的试剂之一，是测定血红蛋白(Hb)和白细胞(WBC)计数或分类的关健试剂。它在稀释液的配合作用下，一方面使红细胞(RBC)迅速溶解，释放出血红蛋白与溶血剂结合形成稳定的血红蛋白衍生物，以供定量测定Hb，另一方面使白细胞维持颗粒状，并保持一定的体积，供WBC计数用。1996年，国际血液学标准化委员会推荐氰化高铁血红蛋白(HiCN)测定法作为国际Hb测定标准方法，其主要物理指标为：在波峰λ＝540nm，波谷λ＝504nm时，具有明显的波峰、波谷。该法虽然能较精确地测量Hb；但不能同时测定WBC，因而，无法应用于临床；目前国内、外临床医学检验学上常用的溶血剂是以有机季胺盐加氰化钾(KCN)组成的混合物，一方面其吸收光谱与HiCN较为接近，另一方面，有机季胺盐破坏RBC后，Hb与KCN迅速生成稳定的CNHb，达到测定Hb的目的，同时又不破坏WBC；但这种配伍的溶血剂，其最大缺点是KCN有剧毒，不仅严重危害实验室工作人员的身体健康，同时，对环境污染也极为严重，虽然临床上制定了极为严格、繁锁的降低氰污染措施，但其对人身、环境的污染还是无法避免。

本发明的目的在于克服现有技术之不足而提供一种既能迅速破坏RBC，又不损害WBC，且其吸收光谱接近HiCN，物理化学性质稳定的，无氰的溶血剂。    

本发明的目的是这样实现的：一般是由在1升重蒸馏水溶剂中，分别加入有机季胺盐4-120g、羟胺盐0.1-20g及弱碱性试剂1-100g组成的混合液构成。

本发明中，季胺盐可在十六烷基三甲基氯化(溴化)铵、十二烷基三甲基氯化(溴化)铵、十八烷基三甲基氯化(溴化)铵、十四烷基三甲基氯化(溴化)铵中任选一种。

本发明中，羟胺盐可在盐酸羟胺盐、硫酸羟胺盐中任选一种。

本发明中，弱碱性试剂可在磷酸氢二钠、磷酸氢二钾中任选一种。

本发明由于采用上述方案，利用同为金属离子掩蔽剂的羟胺盐代替氰化钾，使其与溶血液反应后，形成稳定的血红蛋白衍生物，且在λ＝540nm，λ＝504nm时，吸收光谱具明显的波峰、波谷，吸收光谱曲线与HiCN吸收光谱曲线相似，可满足临床检验的需要；同时，试剂中不含氰化物，无氰性，能有效改善操作人员的工作环境，降低氰物对人身心健康的伤害。可作为现有溶血剂的更新换代产品。

本发明一种血液分析用无氰溶血剂的制作方法简述于下：    

称取十六烷基三甲基溴化铵(CTAB：分析纯)50g，盐酸羟胺(分析纯)4.0g，Na₂HPO₄.12H₂O(分析纯)50g于溶器内，加入200ml左右重蒸馏水溶解，然后，补充重蒸馏水至1升，将溶液过滤，分装即可。

下面结合本发明的实施例，对本发明作进一步详细说明：

附表1为本发明三种实施例的配伍组成。

附表2为本发明三种实施例的物理性能数据。

附表3为本发明三种实施例应用于血常规检验的检验结果。

附图为本发明三种实施例的吸收光谱曲线。

附图中，曲线1为：HiCN-Hb的标准吸收光谱曲线。曲线2为：季胺盐-KCN-Hb的标准吸收光谱曲线。曲线3、4、5则为1、2、3号试剂的标准吸收光谱曲线。

试验条件：

1、仪器：CD 1500、F800型血球计数仪、722型分光光度计。

2、方法：取20份正常人EDTA-K₂抗凝血样品，按仪器规定用稀释液稀释后，分别加入季胺盐-KCN，1、2、3号试剂，(1号试剂采用F800型血球计数仪，其余试剂采用CD 1500血球计数仪。)先进行Hb、WBC分类计数；然后用722型分光光度计测定溶血后形成的血红蛋白衍生物的吸收光谱。

从表1、表2、表3及附图所示结果为：

1、本发明的物理性能指标满足标准要求，在λ＝540nm，λ＝504nm时具明显的波峰、波谷。

2、血常规检验结果：误差＜4％，满足临床检验标准要求，可应用于临床检验中。

综上所述：本发明组份简单，配制方便，性能稳定，能满足临床血常规检验的需要，无氰，可有效改善临床检验人员的工作环境，降低毒物对人体身心的伤害，适于作为现有溶血剂的更新换代产品。

表一表二表三：