[发明专利]一种新的多肽——人Zn－15相关锌指蛋白10.01和编码这种多肽的多核苷酸

说明书

本发明属于生物技术领域，具体地说，本发明描述了一种新的多肽——人Zn-15相关锌指蛋白10.01，以及编码此多肽的多核苷酸序列。本发明还涉及此多核苷酸和多肽的制备方法和应用。

重组L-myc融合基因RLF最早是作为一个与L-myc融合的mRNA被发现。而L-myc主要抗癌基因的扩增和小细胞肺癌相关[Nau et al.，1985；for aview，see：Alitalo et al.，1993]  在一些例子中，这种扩增伴随着染色体的重排。虽然重排L-myc融合后的基因RLF-L-myc的确切功能还不清楚，但是所有这些例子中的融合蛋白都具有同样的结构，表明他们给SCLC细胞生长提供了一个有利的条件。L-myc转录调控因子向RLF的转化，导致了L-myc的反常表达。L-myc氨基末端的改变可以影响L-myc蛋白的活性，因为在它的氨基末端有一个转录激活区域。[K Saksela，personal communication]

最近，对微小基因RLF-L-myc的转基因研究进一步支持了RLF-L-myc融合的功能性作用。[Maclean-Hunter et al.，1994]这个方法刺激了RLF-L-myc的重排，而且这种重排是被RLF基因的调整因子所驱动。当RLF-L-myc被导入转基因小鼠或胚茎细胞中，该微小基因在分化过程被干扰，并且引起早期胚层的致死。RLF-L-myc重排机制可能与基因的扩增过程有关。

研究发现，RLF多肽包含一个亮氨酸拉练结构motif[Landschulz et al.，1998]，RLF也包含了16个锌指结构motif，通常在DNA或RNA结合蛋白中发现[Rhodes and Klug，1993]，其中最接近RLF的是鼠Zn-15，Zn-15已被鉴定为一个转录因子，在生长激素基因中，它和Pit-1共同操纵转录激活[Lipkin etal.，1993]。

RLF和Zn-15定义了一个新的锌指转录因子超家族。在Zn-15中，只有3个和DNA结合有关[Lipkin et al.，1993]，而其余锌指的功能还有待研究。从Zn-15与Pit-1的协同作用以及Zn-15在几个DNA结合部位的结合能力推测，Zn-15和RLF可能通过影响染色质的结构来介导它们的某些功能。

RLF在肌肉、肝脏、大脑和脾脏中大量表达，并且几乎在所有除成人肺以外的组织中都能检测到。另外，在人胎儿的RNA中也有表达。

通过基因芯片的分析发现，在正常脑、肝癌、肌肉、胎脑、胎肾，胎肺、胎肝、甲状腺、胸腺、成人肝、肺、胶质瘤中，本发明的多肽的表达谱与人Zn-15相关锌指蛋白的表达谱非常近似，因此二者功能也可能类似。本发明被命名为人Zn-15相关锌指蛋白10.01。

由于如上所述人Zn-15相关锌指蛋白10.01蛋白在调节细胞分裂和胚胎发育等机体重要功能中起重要作用，而且相信这些调节过程中涉及大量的蛋白，因而本领域中一直需要鉴定更多参与这些过程的人Zn-15相关锌指蛋白10.01蛋白，特别是鉴定这种蛋白的氨基酸序列。新人Zn-15相关锌指蛋白10.01蛋白编码基因的分离也为研究确定该蛋白在健康和疾病状态下的作用提供了基础。这种蛋白可能构成开发疾1病诊断和/或治疗药的基础，因此分离其编码DNA是非常重要的。

本发明的一个目的是提供分离的新的多肽——人Zn-15相关锌指蛋白10.01以及其片段、类似物和衍生物。

本发明的另一个目的是提供编码该多肽的多核苷酸。

本发明的另一个目的是提供含有编码人Zn-15相关锌指蛋白10.01的多核苷酸的重组载体。

本发明的另一个目的是提供含有编码人Zn-15相关锌指蛋白10.01的多核苷酸的基因工程化宿主细胞。

本发明的另一个目的是提供生产人Zn-15相关锌指蛋白10.01的方法。

本发明的另一个目的是提供针对本发明的多肽——人Zn-15相关锌指蛋白10.01的抗体。

本发明的另一个目的是提供了针对本发明多肽——人Zn-15相关锌指蛋白10.01的模拟化合物、拮抗剂、激动剂、抑制剂。

本发明的另一个目的是提供诊断治疗与人Zn-15相关锌指蛋白10.01异常相关的疾病的方法。

本发明涉及一种分离的多肽，该多肽是人源的，它包含：具有SEQ ID No.2氨基酸序列的多肽、或其保守性变体、生物活性片段或衍生物。较佳地，该多肽是具有SEQ ID NO：2氨基酸序列的多肽。

本发明还涉及一种分离的多核苷酸，它包含选自下组的一种核苷酸序列或其变体：