[发明专利]一种新的多肽——核糖核酸酶P4030.69和编码这种多肽的多核苷酸

说明书

本发明属于生物技术领域，具体地说，本发明描述了一种新的多肽——核糖核酸酶P4030.69，以及编码此多肽的多核苷酸序列。本发明还涉及此多核苷酸和多肽的制备方法和应用。

核糖核酸酶是一种对细胞内的RNA具有降解作用的酶，它既参与多种RNA的加工过程，也可能与嘌呤碱基和嘧啶碱基的再循环有关。在生物体中已经鉴定出许多非专一性的核酸外切酶和核酸内切酶，有些是胞外酶或者分泌酶。研究得较为透彻的比如大肠杆菌RNAseII(一种核酸内切酶，位于细胞膜和细胞壁之间的周质空间中)、RNAseII(是胞外3’内核酸外切酶，它迅速水解RNA片段)。

RNA分子在细胞中许多不可缺少的结构、催化和调节作用中起着非常重要的作用，经常与特异性的蛋白辅因子相结合发挥功能。RNA能够折叠为复杂的三维结构，以变化多端的形状和空间排列与蛋白结合形成功能团。核糖核酸酶P(RNaseP)由一个巨大的RNA组分(约400nt)和一个小的基础蛋白(约120个氨基酸)共同结合而成，催化前体tRNA(pre-tRNA)5’端的成熟。在生理条件下高的催化效率和与其相互作用的蛋白辅因子是分不开的。在Rnase P中，蛋白组分虽然能够识别RNA的折叠结构，但是对于RNA的特定的三维结构的形成是不必需的(Pan，T.，1995)。虽然如此，蛋白组分能够改变RNase P的底物的特异性(Peck-Miller，K.A.& Altman，S.，1991；Liu，F.-Y. & Altman，S.，1994)，并且增强RNaseP与前体tRNA的亲和力。

RNase P蛋白亚基具有非常重要的生理学活性，它降低了反应对于酶离子浓度的依赖性(Staley，J.P. & Guthrie，C.，1998)，稳定了RNA亚基的催化活性构象它增强了底物亲和力(Wilson，K.S. & Noller，H.F.，1998)，另外还影响底物特异性(Frank，D.N. & Pace，N.R.，1998)。

通过基因芯片的分析发现，在胎脑、原液培养的L02细胞株、0.5％FBS培养液37.C饥饿的L02细胞株、胎肾、直肠癌，胎肝、成人肝、肝癌、胎肺、胎脾、胎心、成人心、成人睾丸、胎胃、成人胃中，本发明的多肽的表达谱与核糖核酸酶P40的表达谱非常近似，因此二者功能也可能类似。本发明被命名为核糖核酸酶P4030.69。

由于如上所述核糖核酸酶P4030.69蛋白在调节细胞分裂和胚胎发育等机体重要功能中起重要作用，而且相信这些调节过程中涉及大量的蛋白，因而本领域中一直需要鉴定更多参与这些过程的核糖核酸酶P4030.69蛋白，特别是鉴定这种蛋白的氨基酸序列。新核糖核酸酶P4030.69蛋白编码基因的分离也为研究确定该蛋白在健康和疾病状态下的作用提供了基础。这种蛋白可能构成开发疾1病诊断和/或治疗药的基础，因此分离其编码DNA是非常重要的。

本发明的一个目的是提供分离的新的多肽——核糖核酸酶P4030.69以及其片段、类似物和衍生物。

本发明的另一个目的是提供编码该多肽的多核苷酸。

本发明的另一个目的是提供含有编码核糖核酸酶P4030.69的多核苷酸的重组载体。

本发明的另一个目的是提供含有编码核糖核酸酶P4030.69的多核苷酸的基因工程化宿主细胞。

本发明的另一个目的是提供生产核糖核酸酶P4030.69的方法。

本发明的另一个目的是提供针对本发明的多肽——核糖核酸酶P4030.69的抗体。

本发明的另一个目的是提供了针对本发明多肽——核糖核酸酶P4030.69的模拟化合物、拮抗剂、激动剂、抑制剂。

本发明的另一个目的是提供诊断治疗与核糖核酸酶P4030.69异常相关的疾病的方法。

本发明涉及一种分离的多肽，该多肽是人源的，它包含：具有SEQ ID No.2氨基酸序列的多肽、或其保守性变体、生物活性片段或衍生物。较佳地，该多肽是具有SEQ ID NO：2氨基酸序列的多肽。

本发明还涉及一种分离的多核苷酸，它包含选自下组的一种核苷酸序列或其变体：

(a)编码具有SEQ ID No.2氨基酸序列的多肽的多核苷酸；

(b)与多核苷酸(a)互补的多核苷酸；

(c)与(a)或(b)的多核苷酸序列具有至少70％相同性的多核苷酸。

更佳地，该多核苷酸的序列是选自下组的一种：(a)具有SEQ ID NO：1中142-981位的序列；和(b)具有SEQ ID NO：1中1-1419位的序列。