[发明专利]一种新的多肽——人蛋白酶体亚基HC5－24.09和编码这种多肽的多核苷酸

说明书

本发明属于生物技术领域，具体地说，本发明描述了一种新的多肽——人蛋白酶体亚基HC5-24.09，以及编码此多肽的多核苷酸序列。本发明还涉及此多核苷酸和多肽的制备方法和应用。

无论是原核生物还是真核生物，都具有一套降解细胞内蛋白质的有效机制。ATP依赖性蛋白酶在去除不正常蛋白和降解重要生理蛋白过程中处于核心地位。在原核生物中，蛋白酶直接剪切未修饰过的蛋白质底物。真核生物中，选择性的蛋白水解复杂得多，蛋白质在被破坏之前要与泛激素(Ub)形成共价键。

26S蛋白酶是Ub依赖的蛋白质降解途径中的核心蛋白酶，它含有从黏液菌到人类都拥有的一个高度保守的结构。这个延长了的分子的分子量约为2,000kD，其中包括一个20S的核心复合物和两个19S的极复合物。20S复合物拥有C2对称，它由7个环组成，外环与内环之间有26度的旋转夹角。19S帽复合物是不对称的。20S微粒是多重催化蛋白酶(MCP)或蛋白酶体，具有蛋白酶活性，但不是Ub或ATP依赖性酶。19S复合物中含有肽酶，氧化还原酶，ATP酶和蛋白解旋活性。(Enzyme Protein，1993，Lupas A，et.al)

26S Ub/ATP依赖性蛋白酶可降解绝大多数蛋白质。SDS聚丙烯酰胺凝胶电泳显示，26S酶含有20多条多肽，其分子量范围为20至110kD，许多小于30kD的亚基是多催化蛋白酶家族的成员。在人20S蛋白酶体复杂的成分中，五种主要的亚基——HC2，HC3，HC5，HC8和HC9的核苷酸顺序已经确定。从这些多肽的核苷酸顺序推断出，它们分别含有263，234，241，255和261个氨基酸残基，其分子量依次为295 54，2 5897，26487，28431和29482KDa，这些多肽由单个独立的基因编码。人蛋白酶体亚基的主要结构与鼠表现出紧密的相关性，各亚基之间具有较高的同源性，其中HC5的同源性相对较低，但其单链顺序与其它四种亚基的同源性很高。

本发明的人的基因与人蛋白酶体亚基HC5基因在蛋白水平上有100％的同一性和100％的相似性。且两者均含有人蛋白酶体亚基家族的特征性结构域。基于以上各点，故认为本发明的新基因为人蛋白酶体亚基基因，命名为{人蛋白酶体亚基HC5-24.09}。并以此推断其与人蛋白酶体亚基HC5相似，同为人蛋白酶体亚基家族的成员，并具有相似的生物学功能，对蛋白的代谢、水解有重要作用。

由于如上所述人蛋白酶体亚基HC5-24.09蛋白在调节细胞分裂和胚胎发育等机体重要功能中起重要作用，而且相信这些调节过程中涉及大量的蛋白，因而本领域中一直需要鉴定更多参与这些过程的人蛋白酶体亚基HC5-24.09蛋白，特别是鉴定这种蛋白的氨基酸序列。新人蛋白酶体亚基HC5-24.09蛋白编码基因的分离也为研究确定该蛋白在健康和疾病状态下的作用提供了基础。这种蛋白可能构成开发疾病诊断和/或治疗药的基础，因此分离其编码DNA是非常重要的。

本发明的一个目的是提供分离的新的多肽——人蛋白酶体亚基HC5-24.09以及其片段、类似物和衍生物。

本发明的另一个目的是提供编码该多肽的多核苷酸。

本发明的另一个目的是提供含有编码人蛋白酶体亚基HC5-24.09的多核苷酸的重组载体。

本发明的另一个目的是提供含有编码人蛋白酶体亚基HC5-24.09的多核苷酸的基因工程化宿主细胞。

本发明的另一个目的是提供生产人蛋白酶体亚基HC5-24.09的方法。

本发明的另一个目的是提供针对本发明的多肽——人蛋白酶体亚基HC5-24.09的抗体。

本发明的另一个目的是提供了针对本发明多肽——人蛋白酶体亚基HC5-24.09的模拟化合物、拮抗剂、激动剂、抑制剂。

本发明的另一个目的是提供诊断治疗与人蛋白酶体亚基HC5-24.09异常相关的疾病的方法。

本发明涉及一种分离的多肽，该多肽是人源的，它包含：具有SEQ ID No.2氨基酸序列的多肽、或其保守性变体、生物活性片段或衍生物。较佳地，该多肽是具有SEQ ID NO：2氨基酸序列的多肽。

本发明还涉及一种分离的多核苷酸，它包含选自下组的一种核苷酸序列或其变体：

(a)编码具有SEQ ID No.2氨基酸序列的多肽的多核苷酸；

(b)与多核苷酸(a)互补的多核苷酸；

(c)与(a)或(b)的多核苷酸序列具有至少100％相同性的多核苷酸。

更佳地，该多核苷酸的序列是选自下组的一种：(a)具有SEQ ID NO：1中321-980位的序列；和(b)具有SEQ ID NO：1中1-1117位的序列。