[发明专利]一种新的多肽——延胡索酸还原酶/琥珀酸脱氢酶9.13和编码这种多肽的多核苷酸

说明书

本发明属于生物技术领域，具体地说，本发明描述了一种新的多肽——延胡索酸还原酶/琥珀酸脱氢酶9.13，以及编码此多肽的多核苷酸序列。本发明还涉及此多核苷酸和多肽的制备方法和应用。

细菌中有两种不同的膜结合的酶复合物，它们负责转换延胡索酸以及琥珀酸：厌氧生长所需的延胡索酸还原酶(Frd)以及需氧生长所需的琥珀酸脱氢酶(Sdh)。两种复合物都由两种主要成分构成：一种由一个FAD-结合的黄素蛋白以及一个铁硫蛋白构成的膜外成分；另一种是疏水成分，由一个膜锚定蛋白以及一个细胞色素B构成。

在真核生物线粒体中，琥珀酸脱氢酶(泛醌)是一种由两个亚基构成的酶：一个FAD黄素蛋白以及一个铁硫蛋白。黄素蛋白亚基是一种约为60至70Kd的蛋白，FAD共价结合于该蛋白位于N-端的一个组氨酸残基(Blaut M.，Whittaker K.，ValdovinosA.，Ackrell B.A.，Gunsalus R.P.，Cecchini G.，J.Biol.Chem.264：13599-13604(1989))。这个组氨酸残基周围的序列在从细菌到真核生物各物种的Frd以及Sdh中高度保守，可作为一个特征序列模板：R-[ST]-H-[ST]-x(2)-A-x-G-G(Birch-Machin M.A.，Farnsworth L.，Ackrell B.A.，Cochran B.，Jackson S.，Bindoff L.A.，Aitken A.，Diamond A.G.，Turnbull D.M.，J.Biol.Chem.267：11553-11558(1992))。在真核生物中，琥珀酸脱氢酶参与各种代谢反应，例如三羧酸循环等。

本发明新的多肽含有上述的特征序列模板，且具有与延胡索酸还原酶/琥珀酸脱氢酶家族成员相似的生物学功能，因而被认为是延胡索酸还原酶/琥珀酸脱氢酶家族的新成员。该多肽及其激动剂，抑制剂，拮抗剂可用于诊断兼防治与延胡索酸还原酶/琥珀酸脱氢酶所参与的代谢反应相关的疾病，例如癌症，免疫性疾病以及由能量代谢功能障碍而引起的各种疾病例如骨骼肌与心肌疾病以及与中枢神经系统相关的综合征。

由于如上所述延胡索酸还原酶/琥珀酸脱氢酶9.13蛋白在机体内重要功能中起重要作用，而且相信这些调节过程中涉及大量的蛋白，因而本领域中一直需要鉴定更多参与这些过程的延胡索酸还原酶/琥珀酸脱氢酶9.13蛋白，特别是鉴定这种蛋白的氨基酸序列。新延胡索酸还原酶/琥珀酸脱氢酶9.13蛋白编码基因的分离也为研究确定该蛋白在健康和疾病状态下的作用提供了基础。这种蛋白可能构成开发疾病诊断和/或治疗药的基础，因此分离其编码DNA是非常重要的。

本发明的一个目的是提供分离的新的多肽——延胡索酸还原酶/琥珀酸脱氢酶9.13以及其片段、类似物和衍生物。

本发明的另一个目的是提供编码该多肽的多核苷酸。

本发明的另一个目的是提供含有编码延胡索酸还原酶/琥珀酸脱氢酶9.13的多核苷酸的重组载体。

本发明的另一个目的是提供含有编码延胡索酸还原酶/琥珀酸脱氢酶9.13的多核苷酸的基因工程化宿主细胞。

本发明的另一个目的是提供生产延胡索酸还原酶/琥珀酸脱氢酶9.13的方法。

本发明的另一个目的是提供针对本发明的多肽——延胡索酸还原酶/琥珀酸脱氢酶9.13的抗体。

本发明的另一个目的是提供了针对本发明多肽——延胡索酸还原酶/琥珀酸脱氢酶9.13的模拟化合物、拮抗剂、激动剂、抑制剂。

本发明的另一个目的是提供诊断治疗与延胡索酸还原酶/琥珀酸脱氢酶9.13异常相关的疾病的方法。

本发明涉及一种分离的多肽，该多肽是人源的，它包含：具有SEQ ID No.2氨基酸序列的多肽、或其保守性变体、生物活性片段或衍生物。较佳地，该多肽是具有SEQ ID NO：2氨基酸序列的多肽。

本发明还涉及一种分离的多核苷酸，它包含选自下组的一种核苷酸序列或其变体：

(a)编码具有SEQ ID No.2氨基酸序列的多肽的多核苷酸；

(b)与多核苷酸(a)互补的多核苷酸；

(c)与(a)或(b)的多核苷酸序列具有至少70％相同性的多核苷酸。

更佳地，该多核苷酸的序列是选自下组的一种：(a)具有SEQ ID NO：1中306-557位的序列；和(b)具有SEQ ID NO：1中1-2631位的序列。