[发明专利]一种新的多肽——人视醛结合蛋白76.34和编码这种多肽的多核苷酸

说明书

本发明属于生物技术领域，具体地说，本发明描述了一种新的多肽——人视醛结合蛋白76.34，以及编码此多肽的多核苷酸序列。本发明还涉及此多核苷酸和多肽的制备方法和应用。

在人的视网膜上，存在一种分子量约为27-28Kd的感光色素，即视紫红质，它属于结合蛋白质，由一分子视蛋白(opsin)和一分子视黄醛(retinal)的生色基团组成。人处在黑暗的和光照的环境下，视紫红质经历一个可逆反应：视紫红质＝＝＝＝视黄醛+视蛋白，反应的平衡点取决于周围环境的光照强度，光线愈暗，合成过程愈超过分解过程，对光愈是敏感。细胞的视醛结合蛋白(retinaldehyde-binding protein，CRALBP)在脊椎动物视觉过程中作为底物路由蛋白起作用，影响11-顺式视黄醛的酶的分配，在视觉形成周期中的起到关键作用。

在基因组中，人的视醛结合蛋白基因以单拷贝出现，位于染色体15上(Sparks，R.S.；Heinzmann，C.；Goldflam，S.et al.，1992)，整条基因包括了8个外显子和7个内含子序列，平均长度分别为198碱基对和1200碱基对，按照一般的脊椎动物接合方法接合。序列中存在Alu重复序列结构，主要位于内含子4和5以及基因的5’和3’侧序列区域。进行RNase保护和引物延长实验分析表明，人的视醛结合蛋白基因转录起始位点位于翻译起始密码子上游的第922碱基处。整条外显子1都是非翻译区域，外显子2和8包含了部分非翻译区域，外显子8的3’非翻译区的部分序列与一种人海马cDNA文库中分离到的cDNA克隆相似，说明这种蛋白可能在不同的组织中都有表达。在接近5’侧序列的区域缺少GC盒，通常是TATA盒以及CCAAT盒居多(Intres R，Goldflam S，Cook JR，Crabb JW，1994)。人视醛结合蛋白基因组的克隆及其结构研究对于视觉蛋白的生理作用和视觉异常的研究提供了有价值的工具。

通过基因芯片的分析发现，在胎脑、原液培养的L02细胞株、0.5％FBS培养液37.C饥饿的L02细胞株、胎肾、直肠癌，胎肝、成人肝、肝癌、胎肺、胎脾、胎心、成人心、成人睾丸、胎胃、成人胃中，本发明的多肽的表达谱与人视醛结合蛋白的表达谱非常近似，因此二者功能也可能类似。本发明被命名为人视醛结合蛋白76.34。

由于如上所述人视醛结合蛋白76.34蛋白在调节细胞分裂和胚胎发育等机体重要功能中起重要作用，而且相信这些调节过程中涉及大量的蛋白，因而本领域中一直需要鉴定更多参与这些过程的人视醛结合蛋白76.34蛋白，特别是鉴定这种蛋白的氨基酸序列。新人视醛结合蛋白76.34蛋白编码基因的分离也为研究确定该蛋白在健康和疾病状态下的作用提供了基础。这种蛋白可能构成开发疾1病诊断和/或治疗药的基础，因此分离其编码DNA是非常重要的。

本发明的一个目的是提供分离的新的多肽——人视醛结合蛋白76.34以及其片段、类似物和衍生物。

本发明的另一个目的是提供编码该多肽的多核苷酸。

本发明的另一个目的是提供含有编码人视醛结合蛋白76.34的多核苷酸的重组载体。

本发明的另一个目的是提供含有编码人视醛结合蛋白76.34的多核苷酸的基因工程化宿主细胞。

本发明的另一个目的是提供生产人视醛结合蛋白76.34的方法。

本发明的另一个目的是提供针对本发明的多肽——人视醛结合蛋白76.34的抗体。

本发明的另一个目的是提供了针对本发明多肽——人视醛结合蛋白76.34的模拟化合物、拮抗剂、激动剂、抑制剂。

本发明的另一个目的是提供诊断治疗与人视醛结合蛋白76.34异常相关的疾病的方法。

本发明涉及一种分离的多肽，该多肽是人源的，它包含：具有SEQ ID No.2氨基酸序列的多肽、或其保守性变体、生物活性片段或衍生物。较佳地，该多肽是具有SEQ ID NO：2氨基酸序列的多肽。

本发明还涉及一种分离的多核苷酸，它包含选自下组的一种核苷酸序列或其变体：

(a)编码具有SEQ ID No.2氨基酸序列的多肽的多核苷酸；

(b)与多核苷酸(a)互补的多核苷酸；

(c)与(a)或(b)的多核苷酸序列具有至少70％相同性的多核苷酸。

更佳地，该多核苷酸的序列是选自下组的一种：(a)具有SEQ ID NO：1中37-2121位的序列；和(b)具有SEQ ID NO：1中1-2461位的序列。